[发明专利]一种具有光热治疗及创面修复功能的控释水凝胶的制备方法

权利要求书

1.一种具有光热治疗及创面修复功能的控释水凝胶的制备方法，其特征在于：以μg、mg、g、μL和mL计，包括以下步骤：

1）取1-1.5 g 海藻酸加入至47-48 mL MES缓冲液中，搅拌1.5-2.5 h；

2）取85-90 mg 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸和51-55 mg N-羟基琥珀酰亚胺分别溶于1-1.5mL MES缓冲液中；

3）将步骤1）所得溶液置于水浴中升温至60℃，在氮气保护下加入步骤2）所得的 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸溶液和N-羟基琥珀酰亚胺溶液，搅拌1-1.5 h；

4）后取550-600 mg多巴胺加入至步骤3）所得溶液中，搅拌下反应12-16 h；

5）将步骤4）所得溶液透析2-3 d后，用冻干法干燥得到海藻酸-多巴胺粉末；

6）取0.4-0.6 g黑色素溶于8-12 mL去离子水中得到黑色素水溶液，再另取1-1.5 gCuCl₂·2H₂O和300-350 mg聚乙烯吡咯烷酮溶于100-150 mL去离子水中，然后合并两种溶液，搅拌2-3 h后加入150-200 mg Na₂S·9H₂O，然后置于水浴中加热至85-90°C，搅拌15-20min，得到深绿色硫化铜纳米悬浮液；然后在去离子水中透析3-4 d后，离心取沉淀，55-65℃真空干燥过夜，得到硫化铜@黑色素纳米粒；

7）取0.5-0.8 g所述硫化铜@黑色素粒子分散于0.5-0.8 mL水溶液中，超声25-35 min分散均匀，接着将其滴加至18-22 mg/mL的PEG5000-NH₂水溶液中，剧烈搅拌10-14 h，用去离子水洗涤多次，洗去未反应的PEG5000-NH₂；后冻干法除去水，得到硫化铜@黑色素-PEG纳米粒子；

8）取0.4-0.6 g所述硫化铜@黑色素-PEG纳米粒子分散于100-120 mL的缓冲液中，加入0.4-0.6g多巴胺，室温搅拌12-14 h，用去离子水洗涤多次，后冻干法除去水，得到硫化铜@黑色素-PEG@聚多巴胺纳米粒子；

9）取0.8-1.2 mg黄芪甲苷溶于0.8-1.2 mL PBS缓冲液中；

10）取25-35 mg步骤5）所得海藻酸-多巴胺粉末溶于0.8-1.2 mL去离子水中，再加入100-200 μg步骤8）所得硫化铜@黑色素-PEG@聚多巴胺纳米粒和10-20 μL步骤9）所得黄芪甲苷溶液，35-39℃下搅拌2-3 h，加入10-20 μL 1000U/mL的辣根过氧化物酶水溶液，混合均匀后加入10-20 μL 0.4-0.6%的过氧化氢溶液，混合均匀用移液枪转移至PTFE模具中，于35-39℃环境下放置3-4 h成型；

11）将步骤10）成型后的负载有黄芪甲苷及硫化铜@黑色素-PEG@聚多巴胺的海藻酸水凝胶脱模，得到具有光热治疗及创面修复功能的控释水凝胶。

2.如权利要求1所述的一种具有光热治疗及创面修复功能的控释水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤3）和步骤4）中，搅拌期间维持溶液pH为5-6。

3.如权利要求1所述的一种具有光热治疗及创面修复功能的控释水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤5）中，透析过程为：将溶液置于8000 Da透析袋中在酸性环境的去离子水中透析2-3 d。

4.如权利要求1所述的一种具有光热治疗及创面修复功能的控释水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤6）中，所述聚乙烯吡咯烷酮的分子量为24000。

5.如权利要求1所述的一种具有光热治疗及创面修复功能的控释水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤6）中，于超声作用下，将黑色素水溶液在30 min内缓慢地滴加到 CuCl₂·2H₂O和聚乙烯吡咯烷酮水溶液中。

6.如权利要求1所述的一种具有光热治疗及创面修复功能的控释水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤6）中，透析过程为：将溶液置于8000 Da透析袋中在去离子水中透析3-4d。