[发明专利]一种饮用水菌落总数快速检测方法在审
| 申请号： | 201910609990.1 | 申请日： | 2019-07-08 |
| 公开（公告）号： | CN110305930A | 公开（公告）日： | 2019-10-08 |
| 发明（设计）人： | 陈厚忠 | 申请（专利权）人： | 武汉金牛经济发展有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/06 | 分类号： | C12Q1/06 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 穆旭 |
| 地址： | 430000 湖北省*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 菌落 水样 快速检测 载玻片 稀释 饮用水 灭菌 试管 菌落总数检测 计算机采集 金相显微镜 生化培养箱 凹陷区域 成本比较 待测样品 高温压力 浓度梯度 生理盐水 实验仪器 无菌条件 培养基 晾干 凹陷区 调节金 灭菌锅 移液枪 振荡 玻片 滴加 放入 上盖 显微镜 放大 检测 观察 | ||
1.一种饮用水菌落总数快速检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
S1：将移液枪(1)、试管(2)、生理盐水(4)、载玻片(8)及盖玻片(9)在高温压力灭菌锅中121℃下灭菌20min；
S2：将菌落总数培养基铺满灭菌后的载玻片(8)凹陷区域上，并在无菌条件下晾干，得到含有菌落总数培养基的载玻片(8)；
S3：取三支盛有水样的试管(2)，用移液枪(1)分别向三支试管(2)中添加生理盐水(4)，将水样稀释成1:1、1:10、1:100三个浓度梯度的水样；
S4：用混匀仪(5)将稀释后的水样充分振荡均匀，在超净工作台上分别吸取稀释后的1ml水样滴加到含有菌落总数培养基的载玻片(8)凹陷区正中间，并缓慢盖上盖玻片(9)，避免气泡产生；
S5：将载玻片(8)放入生化培养箱(7)中，并打开箱体内的LED灯源(6)开关，培养2小时后取出，用酒精擦盖玻片(9)及载玻片(8)周围，然后放到金相显微镜下观察；
S6：调节金相显微镜目镜放大倍数为10×，物镜放大倍数为10×或40×，计算机控制金相显微镜照相机采集的图像信息并处理，计算出每个待测样品的菌落总数。
2.根据权利要求1所述的一种饮用水菌落总数快速检测方法，其特征在于，S1中所述的生理盐水(4)为0.9％的氯化钠水溶液，试管(2)为25ml的玻璃试管(2)，移液枪(1)量程为0.5-2ml的一次性移液枪(1)。
3.根据权利要求1所述的一种饮用水菌落总数快速检测方法，其特征在于，S2中所述的菌落总数培养基的制备方法具体包括：
在100mL无菌水中加入以下组分及含量：蛋白胨0.8～1.2g、牛肉膏0.2～0.4g、磷酸二氢钾0.1～0.5g、氯化钠0.4～0.6g、丙酮酸钠0.2～0.4g、琼脂1～2g，搅拌溶解后，在121℃灭菌20min，冷却至室温，得到微生物生长基础培养基；再向微生物生长基础培养基中加入已灭菌的1％TTC指示剂1mL，混合摇匀，得到菌落总数培养基。
4.根据权利要求1所述的一种饮用水菌落总数快速检测方法，其特征在于，所述的载玻片(8)整体尺寸为76mm×26mm×1mm，载玻片(8)上的圆形区域直径为22mm，厚度为0.5mm；盖玻片(9)尺寸为24mm×24mm×1mm。
5.根据权利要求1所述的一种饮用水菌落总数快速检测方法，其特征在于，S5中所述生化培养箱(7)恒温，温度为37±1℃。
6.根据权利要求1所述的一种饮用水菌落总数快速检测方法，其特征在于，S5中所述LED灯源(6)为红光COB光源，光源波段为630-640nm。
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