[发明专利]一种小麦应答钠盐纳米粒子的分析方法

说明书

一种小麦应答钠盐纳米粒子的分析方法，属于生物科学、农业科学技术领域，通过器材准备、试剂准备、纳米粒子悬浮液准备、MS培养基准备、MS‑纳米粒子培养基准备、种子消毒、播种、培养、测定评价等过程，可用于分析小麦在钠盐或其它类纳米粒子污染的土地上的生长情况，根系组织如何应答纳米粒子的生理机制，也可广泛用于植物其他抗逆种质资源的筛选与评价，如大麦、水稻、高粱等，本发明整个过程全程在实验室培养的条件下，所用器材简单易得，实验周期短，可以根据样本容量的大小选择不同的测试指标，不仅可以研究植株生长情况，还可以研究小麦根系组织如何应答钠盐纳米粒子，具有较好的社会和经济效益。

技术领域

本发明属于生物科学、农业科学技术领域，涉及一种小麦响应不良环境影响作物产量的方法，具体的说是涉及一种分析种小麦应答钠盐纳米粒子的方法。

背景技术

小麦(学名：Triticum aestivum L.)是禾本科植物，是人类的主食的三大谷物之一，联合国粮食与农业组织2014年的统计数据显示小麦的种植面积位居全世界粮食作物的第一位，产量位居第三，仅次于玉米和水稻。小麦生长发育必需的环境条件包括土壤、水分、养分、温度、光照和空气等。要取得小麦高产，一方面应因地制宜地选用优良品种，另一方面要通过田间管理创造适宜小麦生长发育的环境条件。而苗期是小麦整个生育周期中比较重要的时期，这个时期小麦对各种逆境条件相对比较敏感，如盐胁迫会使小麦幼苗生长受阻、土壤中的有害物质会影响小麦组织的生理变化等。因此，苗期抗逆性分析是小麦种质资源筛选、高产的一个重要方面。

纳米材料是颗粒尺寸在1纳米至100纳米范围内的材料。纳米颗粒已经被用于人类日常生活的多个方面，起到积极的正面效应，如提高效能或耐用性等。然而，任何事物都有两面性，纳米粒子的应用也是如此。如：大量的纳米粒子使用，最后或多或少的释放到空气中，造成了严重的环境污染，如PM2.5的升高。同时，纳米粒子污染还造成土壤污染，尤其是不溶解强酸、强碱的颗粒，严重影响作物的产量。

盐害，是指土壤或水中含盐过多，土壤溶液渗透压过高引起植物生长发育不良的现象。钠盐是作为盐害比较重要的一种无机物。那么，对于一些不溶于强酸、强碱，且含有钠元素的纳米粒子是否会给植株带来危害。因此，为了便于分析钠盐纳米粒子对植物发育的影响，有必要提出一种小麦应答钠盐纳米粒子的分析方法。

发明内容

本发明的目的是针对传统的种质资源筛选方法无法解决根系组织如何应答纳米粒子的生理机制，无法用于对其他植物抗逆种质资源的筛选与评价，目前缺乏一种有效的小麦苗期抗逆性分析，易出现幼苗生长受阻、生理变化等现象，从而导致小麦量产不稳定的不足，提出一种小麦应答钠盐纳米粒子的分析方法，特别是在实验室培养的条件下，小麦如何应答钠盐纳米粒子的方法，以解决上述不足。

本发明的技术方案是：一种小麦应答钠盐纳米粒子的分析方法，其特征在于，所述分析方法包括如下操作步骤：

(1)器材准备：超净台、光照培养箱、方形培养板、镊子、超声破碎仪；

(2)试剂准备：MS培养基浓缩粉末、无菌水、2.5%氯的次氯酸钠溶液、纳米粒子；

(3)纳米粒子悬浮液准备：称取一定重量的纳米粒子，溶解到无菌水中，经过超声破碎仪破碎，形成纳米粒子悬浮液；

(4)MS培养基准备：4.4 g MS培养基浓缩粉末溶解到1 L水中，分装到500 ml锥形瓶，每瓶250 ml，并加入2 g琼脂，然后使用高压灭菌锅，在121℃灭菌15 min，250 ml MS培养基等冷却后平均分配到5个10×10cm的方形平板中，形成固体MS培养板；

(5)MS-纳米粒子培养基准备：灭菌后的MS培养基加入纳米粒子悬浮液，平均分配到5个10×10cm的方形平板中，形成固体MS-纳米粒子培养板；

(6)种子消毒：将小麦种子用33%的次氯酸钠溶液浸泡30 min，无菌水冲洗3～4次；