[发明专利]用于呼吸道病原体多重检测的试剂盒

说明书

本发明提供了用于呼吸道病原体多重检测的试剂盒，具体地，本发明对多重呼吸道病原体PCR扩增体系进行了设计及实验验证，获得了检测多种呼吸道病原体的多重荧光PCR扩增体系，单一体系可同时检测3种呼吸道病原体。本发明的试剂盒具有很高的灵敏度和特异性，通过本发明的试剂盒，能够实现对鼻咽拭子、肺泡灌洗液、痰等样本中的多重呼吸道病原体快速检测和分析。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明涉及一种用于呼吸道病原体多重检测的试剂盒。

背景技术

急性呼吸道感染(acute respiratory tract infection，ARTI)是全球范围内人类最常见的传染性疾病之一，发病率居急性传染病的首位，平均每年下呼吸道感染导致大约4000 000患者死亡。在全球范围内，呼吸道感染是导致5岁以下儿童死亡的主要原因。ARTI—般由细菌和病毒引起，其中大约90％为呼吸道病毒所导致，但死亡及重症的病例主要由细菌感染引起的。面对当前呼吸道传染病防治的复杂形势，加强传染流行病株病疫情信息的监测，可为制订相关传染病的防控策略提供依据；临床上及早明确病原体的型别，进行针对性的抗感染治疗则是控制感染的关键环节。

感染呼吸道系统的病原体种类很多，同时也因季节的不同流行的病原体种类不同。引起患儿出现急性呼吸道感染的病毒主要为甲型流感病毒(Influence A,IVA)、乙型流感病毒(Influence B,IVB)、呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus,RSV)及腺病毒(Adenovirus,ADV)等；引起患儿出现急性呼吸道感染的细菌是肺炎衣原体(Chlamydiapneumoniae，CP)、肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae，MP)、肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae,SP)、嗜肺军团菌(Legionella pneumophila，LP)及流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae,HI)等。在人群中，尤其是儿童中，急性呼吸道感染往往是病毒和细菌混合感染或者继发感染，或单一及多种病毒感染，随着病情的持续发展，混合感染成为一种普遍现象。这对于患儿病情的检测和病原体的确定增加了难度。因此进行呼吸道病原体实验室监测，最大可能地对呼吸道传染病疫情进行预测预警，以期在疫情暴发流行早期及时发现并采取快速的应对措施，减少对社会和经济发展的影响。

目前常用的检测呼吸道病原体的检测方法：培养法、血清学检测、分子生物学检测方法等。

培养法是诊断细菌性感染和病毒感染最可靠的方法，也是诊断的金标准。但这种方法复杂，操作繁琐，周期长，灵敏度低，对样本的要求比较高，而且易出现假阴性的结果。

血清学检测是基于抗原抗体反应原理进行检测，检测周期短，但特异性和灵敏度低，易出现假阴性和假阳性的结果，具有一定的局限性。

因此，本领域技术人员致力于开发准确度高、操作简单，可同时检测多种呼吸道病原体的检测技术，以快速准确的检测呼吸道病原体疫情。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高灵敏度、使用便捷的用于呼吸道病原体多重检测的试剂盒。

本发明的第一方面，提供了一种用于呼吸道病原体多重检测的PCR引物对组，所述引物对组包括第一引物对集，所述第一引物对集包括：

第一引物对，所述第一引物对包括如SEQ ID NO.:11所示的正向引物；和，如SEQID NO.:12所示的反向引物；

第二引物对，所述第二引物对包括如SEQ ID NO.:14所示的正向引物；和，如SEQID NO.:15所示的反向引物；和

第三引物对，所述第三引物对包括如SEQ ID NO.:17所示的正向引物；和，如SEQID NO.:18所示的反向引物。

在另一优选例中，所述引物对组还包括第二引物对集，所述第二引物对集包括：