[发明专利]高特异性无脱靶单碱基基因编辑工具有效
| 申请号： | 201910494323.3 | 申请日： | 2019-06-09 |
| 公开（公告）号： | CN110804628B | 公开（公告）日： | 2023-05-12 |
| 发明（设计）人： | 杨辉;左二伟 | 申请（专利权）人： | 中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N9/78;C12Q1/34 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陈静 |
| 地址： | 200031 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 特异性 脱靶 碱基 基因 编辑 工具 | ||
【权利要求书】：
1.一种降低单碱基编辑器的脱靶效应的方法，包括：在单碱基编辑器系统中，对其中的胞嘧啶脱氨酶进行改造，弱化其与DNA的结合；所述的改造是针对胞嘧啶脱氨酶的DNA结合区域的改造，所述的胞嘧啶脱氨酶为APOBEC1，将其第126位的R突变为E。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述APOBEC1的改造还包括：对APOBEC1酶的第90位的氨基酸进行改造，所述的改造为将其第90位突变为Y。
3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的改造包括：基因突变，靶向性封闭或阻滞，干扰。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的单碱基编辑器系统为BE3基因编辑器系统。
5.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的DNA为单链DNA或双链DNA。
6.一种胞嘧啶脱氨酶的突变体在降低单碱基编辑器的脱靶效应中的用途，所述胞嘧啶脱氨酶的突变体的DNA结合区域发生改造，该改造使得其与DNA的结合被弱化，所述的胞嘧啶脱氨酶为APOBEC1，其第126位的R突变为E。
7.如权利要求6所述的用途，其特征在于，所述的改造还发生在APOBEC1酶的第90位氨基酸上，其第90位突变为Y。
8.如权利要求6所述的用途，其特征在于，所述的DNA为单链DNA或双链DNA。
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