[发明专利]浦东白猪及生肉制品的SNP标记组合和鉴定方法有效
申请号: | 201910463234.2 | 申请日: | 2019-05-30 |
公开(公告)号: | CN110106263B | 公开(公告)日: | 2020-11-17 |
发明(设计)人: | 王起山;潘玉春;岳阳 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 刘静;邱启旺 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 浦东 生肉 制品 snp 标记 组合 鉴定 方法 | ||
本发明公开了一种浦东白猪及生肉制品的SNP标记组合和鉴定方法,通过提取生猪肉或肉制品的基因组DNA,经PCR扩增后进行琼脂糖凝胶电泳和Sanger测序,根据测序结果特点位点的SNP基因型鉴定浦东白猪及其肉制品;所述的Sanger测序,其鉴定位点为:pig18‑52722267、pig8‑146130825、pig9‑10041850和pig13‑213464983位点处出现特异突变;本发明解决现有技术中尚未有浦东白猪及其肉制品相关的鉴定方法的问题。
技术领域
本发明涉及的是一种食品安全监测领域,具体涉及一种浦东白猪及生肉制品的SNP标记组合和鉴定方法。
背景技术
浦东白猪主要分布在上海南汇及川沙等地。其特点是繁殖率高,性成熟早,平均每胎产仔12头左右,阉割后,安静少动,适合软圈饲养,50年代前,是川沙县的当家品种。其因肉质鲜美,称为“糯猪”而广受消费者欢迎。浦东白猪体型外貌与西方长白猪和大白猪相似,在生产中存在用西方猪种冒充浦东白猪的情况。另一方面,浦东白猪分布区域与太湖猪种(二花脸猪、梅山猪、枫泾猪、沙乌头猪、米猪、嘉兴黑猪)分布区域有重合,生产中存在混淆的情况。通过传统方法将浦东白猪与其他品种猪区分难度很大,尤其是宰杀后的分割猪及其处理后的肉制品。随着测序技术的发展,分子标记也由一代的限制性片段长度多态性(RFLP),第二代的数目可变串联重复多态性(SSR),发展到了单核苷酸多态性(SNP)。第三代分子标记SNP相对于前两代分子标记具有变异丰富、对DNA样本要求低、稳定性高、测定准确、检测方法简便且通量高等优点。目前,第三代分子标记SNP已广泛应用于亲子鉴定、动植物品种(品系)鉴定、遗传育种等领域。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足,提出一种鉴定浦东白猪及生肉制品的SNP标记组合和鉴定方法,利用第三代分子标记鉴别及Sanger测序技术鉴别浦东白猪及生肉制品,解决现有技术中尚未有浦东白猪及其肉制品相关的鉴定方法的问题,提供了一种结果准确、操作简单、价格低廉的鉴定浦东白猪及其肉制品的方法和相关专用引物。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的:
一种浦东白猪及生肉制品的SNP标记组合,包括:pig18-52722267、pig8-146130825、pig9-10041850和pig13-213464983,所述pig18-52722267表示猪18号染色体第52722267位位点,pig8-146130825表示猪8号染色体第146130825位位点,pig9-10041850表示猪9号染色体第10041850位位点,pig13-213464983表示猪13号染色体第213464983位位点。
进一步地,基于SNP标记组合的浦东白猪及其生肉制品鉴定方法,首先提取待鉴定的生猪肉或肉制品的基因组DNA,然后经PCR扩增后进行琼脂糖凝胶电泳和Sanger测序,得到SNP标记组合各个检测位点的信息,当SNP标记组合任意三个位点处出现特异突变,即可鉴定为浦东白猪及其肉制品。
进一步地,所述的PCR扩增,pig18-52722267处的上下游引物的序列如SEQ IDNO.1~2所示,pig8-146130825处的上下游引物的序列如SEQ ID NO.3~4所示,pig9-10041850处的上下游引物的序列如SEQ ID NO.5~6所示,pig13-213464983处的上下游引物的序列如SEQ ID NO.7~8所示。
进一步地,测序产物鉴定位点对比信息如下表所示:
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