[发明专利]一种制备细胞块的方法及用于制作细胞块的试剂盒

说明书

本发明涉及一种制备细胞块的方法及用于制作细胞块的试剂盒，其中，所述制备细胞块的方法，采用海藻酸钠溶液和氯化钙溶液作为将缺乏粘附性的松散细胞样本网罗聚集起来的凝固剂；本方法制备细胞块，过程简单、操作简便，整个制备过程，不仅无异源性蛋白成分，减少后续免疫染色时的非特异性着色，而且在常温下即可进行，无需额外进行加热、温度控制等操作，避免高温对细胞的影响；此外，用于制备细胞块的海藻酸钠溶液和氯化钙溶液成本低，且可以长期保存，两种溶液混合后会在短时间内形成固态，可以将松散的细胞网罗起来凝聚成团，大大方便了细胞块的制作。

技术领域

本发明涉及细胞块技术领域，具体涉及一种制备细胞块的方法及用于制作细胞块的试剂盒。

背景技术

细胞病理学主要用于在取得的细胞样本中查找肿瘤细胞等目标细胞，以达到病理诊断目的。细胞块技术是细胞病理学的一项重要技术，是指利用各种方法将缺乏粘附的松散细胞网罗聚集，形成细胞块(类似组织块)，然后进行脱水、包埋、切片，进而可以行免疫细胞化学染色、分子检测等一系列后续实验，以达到对细胞样本的长久保存、精准检测以及指导临床靶向治疗的目的。

与组织病理学相比，细胞学取样更加方便快捷，以其微创、经济、实用等优势，在病理诊断方面发挥不可替代的作用。但之前的细胞学样本仅能做成涂片，不能富集成细胞块，进行包埋切片，无法发挥细胞学取样便捷的优势，大大限制了细胞学的发展。近几年，随着细胞块技术的开发及发展，利用细胞学样本制作细胞块成为细胞学热点技术，凝聚形成的细胞块可以同组织样本一样进行处理，在发挥细胞学取样优势的同时，可以进行更多的后续实验，提高诊断精准性，并且可以将细胞块样本进行分子检测，为临床靶向治疗提供依据。

细胞块制作的关键是如何将松散细胞凝聚包裹起来，现有技术中，细胞块制作常用的细胞凝聚物质有琼脂、蛋清、血浆及凝血酶、肠衣(取自猪肠的肠纤维膜)等，采用这些物质制作细胞块，通常存在一些不足：1、细胞块的制备过程繁琐(即使得细胞凝聚成块的过程繁琐)，例如，在中国专利CN108303295A所公开的一种细胞块制备方法，采用琼脂作为凝固剂，由于琼脂通常为固体，在使用时，需要先将琼脂加热融化，然后等熔融状态的琼脂降低到合适的温度后，才能加入细胞样本中，最后使其自然冷却，获得凝固后的细胞块；此过程，不仅操作麻烦，而且还需要合理的控制琼脂的温度；

2、细胞块的制备过程耗时长；

3、成本较高，使用量大，例如采用血浆凝血酶法制作细胞块，成本通常较高；

4、利用生物源性物质包埋细胞样本获得细胞块，效果不稳定，并且切片后背景着色重，例如，采用蛋清制备的细胞块，后期使用过程中易染色，增加无效背景影响检测结果。

发明内容

本发明的目的在于改善现有技术中，细胞块制备过程中存在的制备过程繁琐、耗时长、成本较高、效果不稳定等不足，提供了一种制备细胞块的方法，本方法采用海藻酸钠溶液和氯化钙溶液作为将缺乏粘附性的松散细胞样本网罗聚集起来的凝固剂。海藻酸钠溶液和氯化钙溶液是现有技术中常见的化学用品，无毒无害，且价格低廉，采用海藻酸钠溶液和氯化钙溶液作为凝聚细胞样本的凝固剂，不仅能将细胞样本中松散的细胞凝聚、包裹，并形成细胞块，而且还具有以下优点：

1、制备细胞块的过程简单、且耗时短，既可以大大简化操作，又可以大大缩短制备细胞块的操作时间；

2、整个制备过程，无异源性蛋白成分，使得细胞块的效果稳定，减少后续免疫染色时的非特异性着色；

3、整个制备过程，在常温下进行，无需额外进行加热、温度控制等操作，既可以简化操作，又可以有效避免高温对细胞的影响；

4、用于制备细胞块的海藻酸钠溶液和氯化钙溶液可以长期保存，而且两种溶液混合后会在短时间内形成固态，可以将松散的细胞网罗起来凝聚成团，有利于大大缩短制备细胞块所需的时间。