[发明专利]一种狂犬疫苗核酸消化去除装置及实验方法有效
申请号: | 201910433004.1 | 申请日: | 2019-05-23 |
公开(公告)号: | CN111979120B | 公开(公告)日: | 2022-09-27 |
发明(设计)人: | 朱希灿 | 申请(专利权)人: | 比欧联科供应链管理(北京)有限公司 |
主分类号: | C12M1/40 | 分类号: | C12M1/40;C12M1/36;C12M1/34;C12M1/12;C12M1/02;C12N7/00;C12N7/02 |
代理公司: | 北京智行阳光知识产权代理事务所(普通合伙) 11738 | 代理人: | 黄锦阳 |
地址: | 100000 北京市顺义区金*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 狂犬 疫苗 核酸 消化 去除 装置 实验 方法 | ||
1.一种狂犬疫苗核酸消化去除装置,包括底板(1)、操作箱(2)、箱门(3)、充电孔(4)、开关(5)、操作台(6)、操作面板(7)、散热孔(8)、调节箱(9)、疫苗液注入管(10)、PBS缓冲液注入管(11)、驱动电机(12)、转轴(13)、微滤中空纤维膜(14)、第一搅拌叶(15)、第二搅拌叶(16)、电磁阀(17)、超滤中空纤维膜(18)、pH测试头(19)、盐浓度测试头(20)、pH值测试仪(21)、盐浓度测试仪(22)、第一注入口(23)、第二注入口(24)、导液泵(25)、处理罐(26)、隔板(27)、电源(28)、弹簧(29)、减震棉(30)、电箱(31)、交换室(32)、灭活室(33)、酶处理室(34)、纯化室(35)、阴离子交换介质口(36)、灭活剂口(37)、加热丝(38)、限制性核酸内切酶口(39)、凝胶过滤柱(40)和储存室(41),其特征在于:所述底板(1)的顶部一端设置有操作箱(2),所述操作箱(2)的内壁中间对称焊接有隔板(27),所述隔板(27)上分别设置有电源(28)和电箱(31),所述操作箱(2)的内壁底部对称设置有弹簧(29),所述弹簧(29)与隔板(27)空隙处填充有减震棉(30),所述操作箱(2)一侧设置有调节箱(9),所述调节箱(9)一侧分别安装有pH值测试仪(21)和盐浓度测试仪(22),所述调节箱(9)表面中间一侧对应两端分别开设有第一注入口(23)和第二注入口(24),所述调节箱(9)的顶部一侧对应两端分别焊接有疫苗液注入管(10)和PBS缓冲液注入管(11),所述调节箱(9)的内壁顶部焊接有驱动电机(12),所述驱动电机(12)的输出端通过转轴(13)分别与第一搅拌叶(15)和第二搅拌叶(16)固定连接,所述第一搅拌叶(15)上方设置有微滤中空纤维膜(14),且PBS缓冲液注入管(11)底部一端伸入到微滤中空纤维膜(14)下方,所述调节箱(9)的内壁中间设置有电磁阀(17),所述电磁阀(17)的下方安装有超滤中空纤维膜(18),所述调节箱(9)的内壁底部一侧对应两端分别安装有pH测试头(19)和盐浓度测试头(20),所述调节箱(9)另一侧通过导液泵(25)与处理罐(26)连接,所述处理罐(26)内壁顶部设置有交换室(32),所述交换室(32)一侧开设有阴离子交换介质口(36),所述交换室(32)底部设置有灭活室(33),所述灭活室(33)一侧开设有灭活剂口(37),所述灭活室(33)底部设置有酶处理室(34),所述酶处理室(34)一侧开设有限制性核酸内切酶口(39),所述酶处理室(34)中间一侧对应两端均安装有加热丝(38),所述酶处理室(34)底部设置有纯化室(35),所述纯化室(35)中间设置有凝胶过滤柱(40),所述纯化室(35)底部设置有储存室(41);所述微滤中空纤维膜(14)孔径为0.45μm,所述超滤中空纤维膜(18)孔径为300KD。
2.根据权利要求1所述的狂犬疫苗核酸消化去除装置,其特征在于:所述操作箱(2)的表面一侧通过合页铰接有箱门(3),所述箱门(3)表面一侧焊接有拉手。
3.根据权利要求2所述的狂犬疫苗核酸消化去除装置,其特征在于:所述操作箱(2)的表面一侧顶部一端开设有充电孔(4),所述操作箱(2)的表面一侧顶部另一端安装有开关(5),所述操作箱(2)的顶部设置有操作台(6),所述操作台(6)表面一侧设置有操作面板(7)。
4.根据权利要求3所述的狂犬疫苗核酸消化去除装置,其特征在于:所述操作箱(2)的表面一侧底部均匀开设有散热孔(8)。
5.一种根据权利要求1-4任一项所述的狂犬疫苗核酸消化去除装置的实验方法,包括步骤一,疫苗液过滤浓缩;步骤二,pH值和盐浓度调节;步骤三,阴离子交换;步骤四,灭活;步骤五,酶处理;步骤六,纯化;其特征在于:
所述步骤一中,将疫苗液通过疫苗液注入管(10)导入调节箱(9)内,疫苗液通过微滤中空纤维膜(14)进行初步澄清过滤,形成滤液,通过PBS缓冲液注入管(11)注入PBS缓冲液到滤液内,形成混合液,打开开关(5),驱动电机(12)工作,通过转轴(13)带动第一搅拌叶(15)和第二搅拌叶(16)转动,对混合液进行充分的搅拌,打开电磁阀(17),混合液通过超滤中空纤维膜(18)进行再次澄清过滤,得到处理后的疫苗液;所述微滤中空纤维膜(14)孔径为0.45μm,所述超滤中空纤维膜(18)孔径为300KD;
所述步骤二中,pH值测试仪(21)和盐浓度测试仪(22)工作,通过pH测试头(19)和盐浓度测试头(20)对处理后的疫苗液进行pH值和盐浓度进行测试,通过第一注入口(23)往调节箱(9)内添加盐酸和氢氧化钠溶液调节疫苗液的pH值,通过第二注入口(24)往调节箱(9)内添加氯化钠溶液调节疫苗液的盐浓度;调整疫苗液的pH值在6~8之间,盐浓度在0.2~0.5mol/之间;
所述步骤三中,通过导液泵(25)将调节pH值和盐浓度后的疫苗液导入到处理罐(26)的交换室(32)内,通过阴离子交换介质口(36)往交换室(32)内注入阴离子交换介质,进行阴离子交换处理;
所述步骤四中,阴离子交换处理后的疫苗液进入到灭活室(33)内,通过灭活剂口(37)往灭活室(33)内注入灭活剂,灭活24~36h,灭活过程中控制灭活体系pH稳定在7.0~7.4之间;所述灭活剂为β-丙内酯,灭活剂占疫苗液体积的0.05~0.2%;
所述步骤五中,灭活后的疫苗液进入到酶处理室(34)内,通过限制性核酸内切酶口(39)往酶处理室(34)内注入限制性核酸内切酶,消化核酸,加热丝(38)工作,将疫苗液温度调节到30~37℃之间,静置24h;
所述步骤六中,静置后的疫苗液进入到纯化室(35),通过凝胶过滤柱(40)进行凝胶过滤处理,进一步对核酸进行去除,去除后的疫苗液进入到储存室(41)储存。
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