[发明专利]α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶及其编码基因和应用有效
| 申请号： | 201910369472.7 | 申请日： | 2019-05-05 |
| 公开（公告）号： | CN110157696B | 公开（公告）日： | 2020-01-17 |
| 发明（设计）人： | 韩秀林;李铭刚;赵江源;蒋明星;包崇卯;李芮;刘兴;艾黎;文孟良 | 申请（专利权）人： | 云南与诺生物工程有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N9/24 | 分类号： | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 11283 北京润平知识产权代理有限公司 | 代理人： | 刘依云;乔雪微 |
| 地址： | 650117 云南省昆明市*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 阿拉伯呋喃糖苷酶 人参皂苷 编码基因 制备 耐受性 应用 基因工程技术 生物医药领域 转基因细胞系 葡萄糖 阿拉伯糖 稳定性强 重组载体 表达盒 酶活性 水解酶 重组菌 催化 基因 表现 | ||
1.一种α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶，其特征在于，其为(a)、(b)或(c)：
(a)由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列组成的酶；
(b)由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的氨基末端或羧基末端连接有标签的氨基酸序列组成的酶；
(c)由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的氨基末端和羧基末端连接有标签的氨基酸序列组成的酶。
2.编码权利要求1所述的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶的基因。
3.根据权利要求2所述的基因，其中，所述基因的序列如SEQ ID NO：2所示。
4.一种制备权利要求1所述的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶的方法，其特征在于，该方法包括：将编码所述α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶的基因插入载体，用所得重组载体转化表达宿主，并诱导表达宿主表达所述基因。
5.包含权利要求2或3所述基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。
6.权利要求1所述α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶、权利要求2或3所述的基因、以及权利要求5所述的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌中的任意一项在制备人参皂苷Rd中的应用。
7.一种制备人参皂苷Rd的方法，该方法包括：将含有人参皂苷Rc的原料与酶进行接触，其特征在于，所述酶含有权利要求1所述的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，相对于每毫克的人参皂苷Rc，所述α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶的用量为2-10U。
9.根据权利要求7所述的方法，其中，所述接触的条件包括：温度为25-55℃，pH值为4-9，时间为10-60min。
10.根据权利要求7-9中任意一项所述的方法，其中，所述酶还含有β-D-葡萄糖苷酶；所述原料还含有人参皂苷Rb1、Rb2、Rc和Rb3中的至少一种。
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