[发明专利]光周期敏感基因、重组载体、重组细胞、重组体系及其应用

说明书

本发明涉及分子生物学领域，具体涉及光周期敏感基因、重组载体、重组细胞、重组体系及其应用。一种大豆光周期敏感基因，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，通过RT‑PCR技术对该基因进行了扩增，并以该基因构建了重组质粒和表达载体，并通过冻融法转化农杆菌感受态细胞获得重组细胞，并获得含有目的基因的植物体，过表达该基因的植物体能够延迟植物体的开花时间，还能调节植物体内光周期影响因子的表达量，进一步影响植物的生育期。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，具体涉及光周期敏感基因、重组载体、重组细胞、重组体系及其应用。

背景技术

植物体的光周期敏感程度由植物体内相关的基因控制，而作物的产量与光周期反应有着密切的联系。

在现有的研究中，CO(CONSTANS)和COL(CONSTANS-like)基因被认为是在光周期和生物钟调节过程中起到协调和保护作用，其中CO基因在两种不同光照条件下通过生物钟调控植物开花，产生的峰值与光照长短有关，在短日照条件下，CO基因产生的峰值主要局限在黑夜，而在长日照条件下CO的峰值在白天产生；COL基因是CO的同源基因，通过相关的试验证明了COL基因在水稻中无论是长日照还是短日照均表现为抑制开花。

但是上述光周期敏感基因的研究主要在拟南芥等模式植物中，应用的局限性较大，所以挖掘和研究新型的光周期调控成花相关基因是有必要的。

发明内容

针对现有技术中存在不足，本发明所提供的技术方案是：

一种大豆光周期敏感基因，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还公开了光周期敏感基因的重组载体，重组细胞或者重组体系。

本发明还公开了光周期敏感基因在延迟植物开花，调整植物生育期的应用。

所述的光周期敏感基因在延迟植物开花，调整植物生育期的应用，所述应用的步骤如下:

将所述大豆光周期敏感基因与第一质粒载体在连接克隆体系中反应，获得第一重组质粒；

以所述第一重组质粒为模板，在含有预定的扩增引物的扩增体系中进行扩增，获得目的基因片段；

将第二质粒载体在预定的酶切体系中进行酶切处理2-3h后，在60-68℃条件下限制酶失活，获得线性化载体；

将所述线性化载与所述目的基因片段混合，在孵育器反应，获得植物过表达载体；

将所述植物过表达载体通过冻融法转化农杆菌感受态细胞中，获得重组细胞；

将所述重组细胞按照预定的方法引入植物体，获得含有光周期敏感基因的植物体。

有益效果：

本发明首次提供了一个大豆的光敏感基因，通过RT-PCR技术对该基因进行了扩增，并以该基因构建了重组质粒和表达载体，并通过冻融法转化农杆菌感受态细胞获得重组细胞，并获得含有目的基因的植物体，过表达该基因的植物体能够延迟植物体的开花时间，还能调节植物体内光周期影响因子的表达量，进一步影响植物的生育期。

附图说明

附图1为实施例4给出的一种重组载体的结构图；

附图2为吉农18突变体总RNA电泳图；

附图3为cDNA扩增GmELF4-LIKE4基因电泳图；

附图4为pMD-18T-GmELF4-LIKE4的扩增基因电泳图；

附图5为扩增序列的Sanger测序结果；

附图6为重组载体pCAMBIA3301-GmELF4-LIKE4的鉴定电泳图；