[发明专利]用于构建BRCA1/2基因变异检测文库的自动化试剂盒有效
| 申请号： | 201910366839.X | 申请日： | 2019-04-30 |
| 公开（公告）号： | CN110029103B | 公开（公告）日： | 2022-12-27 |
| 发明（设计）人： | 陈俊;李夏静;陈才夫;李福根;许青;熊磊 | 申请（专利权）人： | 上海思路迪生物医学科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806;C40B50/06 |
| 代理公司： | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人： | 张莹 |
| 地址： | 201114 上海市闵行区新骏*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 构建 brca1 基因 变异 检测 文库 自动化 试剂盒 | ||
1.一种用于BRCA1/2基因的扩增子文库构建试剂盒，所述试剂盒包含：1)用于进行第一轮PCR扩增的第一引物，2)用于进行第二轮PCR扩增的第二引物，3)第三引物和第四引物，其用于以第二轮PCR扩增产物为模板进行第三轮PCR扩增，构建目的基因的扩增子文库，其中第一引物和第二引物为BRCA1/2基因的特异性引物，其中上述1)、2)和3)分别置于分开的容器中，其中第一引物和第二引物分别为正向引物和反向引物，或分别为反向引物和正向引物，其中第一引物和第二引物包括下述引物中靶向BRCA1/2基因的特异性序列：
BRCA2_26_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTGCATCCCTGTGTAAGTGCATTTTGGTC
BRCA2_26_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTACACACATAAGGAACAGTTTATGGTTC
BRCA2_27_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTCTGTCACTGGTTAAAACTAAGGTGGGA
BRCA2_27_F2 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTAAGGGCTGACTCTGCCGCTG
BRCA2_27_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTAATTTATCTAATTCTTTTACAGGAGATTGGTA
BRCA2_27_R2 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTCCAAACCTATGAGACATTATTTTCATCG
BRCA2_30_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTCTTTTAAAAATAAGATAAACTAGTTTTTGCCAG
BRCA2_30_F2 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTTTAACAATTTTCCCCTTTTTTTACCCC
BRCA2_30_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTGTAGAATATTTACCTTCACAAACTTTGGT
BRCA2_30_F3 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTTGAAAAAATAATATCCTTAATGATCAGGGC
BRCA2_30_R2 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTGAGGAAAGAAAATAGTTTATTTTTTATAGAAATGC
BRCA2_30_R3 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTGAGATGACAATTATCAACCTCATCTGC
BRCA2_32_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTGATGTCTGACAAAAAATAAGTTTTTGCA
BRCA2_32_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTCACAGGAAGTTAAAATCACATATAGGAC
BRCA2_34_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTAAATTATATGGCTTATAAAATATTAATGTGCTTC
BRCA2_34_F2 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTCTAGCAAGACTAGGAAAAAAATTTTCC
BRCA2_34_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTAGATTTTTCACATTCATCAGCGTTTGC
BRCA2_34_F3 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTTAACCCTTTCAGGTCTAAATGGAGCCC
BRCA2_34_R2 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTTCACATGAAGAAATATGCAATAGGGGT
BRCA2_34_F4 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTAATCTCATACAGACTGCATTCTTGCAG
BRCA2_34_R3 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTCCACTGGAGAAGTTCCAGATATTGCCT
BRCA2_34_F5 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTTACTGTTTGCTCACAGAAGGAGGACTC
BRCA2_34_R4 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTCCAGCTTCCATTATCAATTAAATTTGGA
BRCA2_34_F6 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTAATCAGAACTAATTAACTGTTCAGCCC
BRCA2_34_R5 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTGTAAGTGGTGCTTCAAAAGCATTTGCT
BRCA2_34_R6 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTGCAAACTTATCTACCATGTTTGAGTGA
BRCA2_37_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTTGTCTCAAATTTTTTGTGTATTTACAG
BRCA2_37_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTAAGTGTTAACTTCTTAACGTTAGTGTC
BRCA2_38_F2 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTATGAGACACTTGATTACTACAGGCAGA
BRCA2_38_F3 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTAAGCAAAACATTGATGGACATGGCTCT
BRCA2_38_R2 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTTTCTTCACACTTTGTGAAAGTTACAGC
BRCA2_38_R3 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTGGATTTAGAAAATCTAAAACATTAAAAAGGGC
BRCA2_42_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTTGTTTAAACAGTGGAATTCTAGAGTCA
BRCA2_42_F2 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTGTAGTGCAGATACCCAAAAAGTGGCC
BRCA2_42_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTTCTAACTGGGCCTTAACAGCATACCAC
BRCA2_42_R2 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTAGAATTTAACTGAATCAATGACTGATTTTTAC
BRCA2_44_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTTTATATATGTGACTTTTTTGGTGTGTGTA
BRCA2_44_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTGTTAAATTCAAAGTCTCTAAGACTTTGTTC
BRCA2_45_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTTATGCTTGGTTCTTTAGTTTTAGTTGC
BRCA2_45_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTAACATACTCCTTCCTGTGATGGCCAG
BRCA2_47_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTTAGATGGAACTTTTTTGTTCTGATTGC
BRCA2_47_F2 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTAAGGGATGTCACAACCGTGTGGA
BRCA2_47_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTTTCTTTTTTTGAATAGCTTACAATACGC
BRCA2_47_R2 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTATACAGATCCTCTTTTATATTATCTCTTTGTG
BRCA2_50_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTGTTTGCAATTTATAAAGCAGCTTTTCC
BRCA2_50_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTACTAGGTATACAACAGAATATACGATGG
BRCA1_1_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTGAGCTCCCAGGGCCTGGAAAGGCCAC
BRCA1_1_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTGGACCCTGGAGTCGATTGATTAGAGC
BRCA1_3_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTCTCCCTCTCTGACAGGGCACC
BRCA1_3_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTGGCAAATTGACTTAAAATCCATACCCC
BRCA1_5_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTGAACTCTGGGGTTCTCCCAGGC
BRCA1_5_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTAAGATCTTCTGAAATCCAGTAGTGTTC
BRCA1_7_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTACTATATGACTGAATGAATATCTCTGGTTA
BRCA1_7 R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTAATGTTTAAATTAAACATCAACTCTGTCTC
BRCA1_8_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTCTGAGGTGTTAAAGGGAGGAGGGGA
BRCA1_8_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTGTGGTGTTTTCAGCCTCTGATTCTGTC
BRCA1_10_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTACTGTGATTGTTTTCTAGATTTCTTCC
BRCA1_10_F2 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTGCAGTATCAGTAGTATGAGCAGCAGCT
BRCA1_10_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTAAGTTGCAGAATCTGCCCAGAGTCC
BRCA1_10_R2 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTACTTTGTAATTCAACATTCATCGTTGT
BRCA1_11_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTAAATCAAAGTGTTTGTTCCAATACAGC
BRCA1_11_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTTATGATTTGTCCTTTCACAATTGGTGG
BRCA1_12_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTTTAACAATCAGAGTTCAATATAAATAAAGATGTC
BRCA1_12_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTAAAGCAGTAAAGTAGATTTGTTTTCTC
BRCA1_14_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTTTGCTTAAGATATCAGTGTTTGGCCAA
BRCA1_14_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTGCTTCTCAAAGTATTTCATTTTCTTGGT
BRCA1_17_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTGCCTGTTAAGTTGGCAAACTTTGCC
BRCA1_17_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTCAACTAGAAGTTTCTAAAGGAGAGAGC
BRCA1_18_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTTTAATATTAACTAAATAGGAAAATACCAG
BRCA1_18_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTGTATTACATACTAGCTTAACTAGCATTGTAC
BRCA1_19_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTGCAATTATTATTAAATACTTAAAAAACCTGAGAC
BRCA1_19_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTTTTTTTCCAGGCATCATACATGTTAGC
BRCA1_21_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTACAGCACTTGAGTGTCATTCTTGGGA
BRCA1_21_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTATTGATTATAGAGGTTTTCTACTGTTGC
BRCA1_22_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTTCTACTTTTTCCTACTGTGGTTGCTTC
BRCA1_22_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTTTAGGAAACTATTGCTTGTAATTCACC
BRCA1_23_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTACAAAAACAAAAGCTAATAATGGAGCC
BRCA1_23_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTTATTCTCTGCTGTATTCTCAGTTCCTG
BRCA1_24_F1 CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTTCCCAAATTAATACACTCTTGTGCTGA
BRCA1_24_R1 ACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTAAAGGACGTTGTCATTAGTTCTTTGGT。
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