[发明专利]同步检测黄曲霉毒素、环匹阿尼酸、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的时间分辨荧光试剂盒

说明书

本发明公开了同步检测黄曲霉毒素、环匹阿尼酸、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的时间分辨荧光试剂盒。其包括免疫层析时间分辨荧光试纸条和铕标记的各单克隆抗体冻干品的样品反应瓶，所述荧光试纸条包括底板，底板的粘性面从上到下依次粘贴吸水垫、检测垫和样品垫，相邻各垫在连接处交叠连接，所述的检测垫以硝酸纤维素膜为基垫，硝酸纤维素膜上自上而下设置横向质控线和检测线，所述质控线上包被有兔抗鼠多克隆抗体，个数为4条，分别包被各毒素蛋白偶联物，抗环匹阿尼酸单克隆抗体由保藏编号为CCTCC NO.C201871的杂交瘤细胞株YTT‑2分泌产生。可用于样品中黄曲霉毒素、环匹阿尼酸、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮含量的同步检测，具有操作简单、快速、灵敏度高的特点。

技术领域

本发明属生物检测领域，涉及真菌毒素免疫层析时间分辨荧光试剂盒，具体涉及一种同步检测黄曲霉毒素、环匹阿尼酸、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的时间分辨荧光试剂盒。

背景技术

真菌毒素是真菌在适宜条件下产生的一类毒性很强的化学物质，能广泛污染大米、玉米、花生、饲料等农产品。真菌毒素可通过直接摄取、吸入以及皮肤接触等方式进入人体及牲畜体内，对人类及动物的健康造成威胁。为了保障粮食卫生安全，我国对粮食中的真菌毒素制定了相关的限量标准(GB 2761-2011)。黄曲霉毒素是黄曲霉和寄生曲霉等产生的一组结构类似的次生代谢产物，因其致癌、致畸、致突变以及免疫抑制作用，已被列为Ⅰ类致癌物质；环匹阿尼酸主要是由黄曲霉和寄生曲霉分泌产生的次生代谢产物，可导致心细胞变性，胞膜通透性增加，神经元坏死等症状；赭曲霉毒素是由曲霉和青霉产生的一类真菌毒素，其中赭曲霉毒素A的毒性最强且产毒量最高，能导致肝脏与肾脏的毒害，引起肾小管上皮损伤和肠道淋巴腺体坏死；玉米赤霉烯酮是由镰刀菌产生的真菌毒素，具有免疫毒性、肝毒性、遗传毒性、潜在致癌性、类似雌激素的毒作用，对肿瘤发生也有一定影响，对人和动物的健康有潜在危害。随着人们对食品安全要求的提高，需要加强农产品中真菌毒素的检测，开发安全、可靠的检测技术，提高我国食品安全水平。

现有真菌毒素的检测方法包括薄层层析法、精密仪器分析法和免疫学分析法。其中薄层层析法是较早用于检测真菌毒素最常用的检测方法，该法不需要特殊的仪器设备，一般实验室都可进行，但试剂用量大、操作繁琐、其它组分干扰严重、准确性差，不能准确定量，且对实验人员和周围环境污染危害较大，不适于现场快速检测。精密仪器分析法主要包括液相色谱-质谱联用法和高效液相色谱法，这些方法灵敏度高，准确性好，但又有仪器昂贵，要求真菌毒素样品纯化程度高，样品前处理过程繁琐，耗时长，对实验环境要求高等不足，难以实现快速检测。免疫分析技术克服了前两者的缺点，具有特异性强、灵敏度高、样品前处理简单、成本低、对实验人员和周围环境的污染危害小、适于现场批量检测等优点，已应用于食品、医疗等多个领域。

发明内容

本发明所要解决的问题是提供一种能同步检测黄曲霉毒素、环匹阿尼酸、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的时间分辨荧光试剂盒。该免疫层析时间分辨荧光试剂盒可用于样品中黄曲霉毒素、环匹阿尼酸、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮含量的同步检测，具有操作简单、快速、灵敏度高的特点。

为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案为：

同步检测黄曲霉毒素、环匹阿尼酸、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的时间分辨荧光试剂盒，它包括免疫层析时间分辨荧光试纸条和铕标记的抗黄曲霉毒素单克隆抗体、铕标记的抗环匹阿尼酸单克隆抗体、铕标记的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体和铕标记的抗米赤霉烯酮单克隆抗体冻干品的样品反应瓶，其中：所述荧光试纸条包括底板，底板的粘性面从上到下依次粘贴吸水垫、检测垫和样品垫，相邻各垫在连接处交叠连接，所述的检测垫以硝酸纤维素膜为基垫，硝酸纤维素膜上自上而下设置横向质控线和检测线，所述质控线上包被有兔抗鼠多克隆抗体，所述检测线个数为4条，检测线上分别上包被黄曲霉毒素B1-牛血清白蛋白偶联物、环匹阿尼酸-卵清蛋白偶联物、赭曲霉毒素A-牛血清白蛋白偶联物和玉米赤霉烯酮-牛血清白蛋白偶联物，所述抗环匹阿尼酸单克隆抗体由保藏编号为CCTCCNO.C201871的杂交瘤细胞株YTT-2分泌产生。