[发明专利]青蒿琥酯在AKT/mTOR激活的人肝癌HepG2细胞药物中的应用

说明书

本发明公开了一种青蒿琥酯在制备治疗AKT/mTOR信号通路激活的人肝癌HepG2细胞的药物中的应用。所述青蒿琥酯能够降低p‑AKT、p‑S6、c‑Myc的表达，进而抑制人肝癌HepG2细胞增殖。本发明中首次发现青蒿琥酯对人肝癌HepG2细胞具有增殖抑制作用，并呈现良好的时间和浓度依赖性，青蒿琥酯能够通过抑制AKT/mTOR通路的P‑AKT、P‑S6、c‑Myc的表达，进而抑制人肝癌HepG2细胞增殖；因此，青蒿琥酯可以作为抑制AKT/mTOR信号通路的激活，阻滞G2/M期候选药物进行研究和开发。

技术领域

本发明属于肝癌治疗领域，具体涉及青蒿琥酯在制备治疗AKT/mTOR信号通路激活的人肝癌HepG2细胞药物中的应用。

背景技术

原发性肝癌是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一，随着医疗水平的发展，肝癌的诊断和治疗有了很大的改善，包括外科手术、肝移植、化学疗法、免疫疗法、放射疗法等。但是，肝癌的预后仍然很差，这一方面归咎于肝癌的高发病率及高转移率；另一方面，归咎于肝癌细胞对常用的抗肿瘤药物和放化疗等治疗措施的耐药性，以及化疗药物的副反应的存在，使得肝癌患者难以取得满意的治疗效果。

因此，迫切需要一种新的肝癌治疗靶点并探索相关的机制，现在临床上对肿瘤的治疗多采用联合疗法，联合疗法能够有效抑制肿瘤的生长，增加疗效，降低毒副反应，抑制肿瘤的侵袭转移，这对肝癌的治疗具有很好的借鉴意义。

青蒿琥酯是从青蒿中分离出来的青蒿素的衍生物，已被中国政府批准用于治疗疟疾，特别是抗脑疟疾。研究表明，它具有许多生物活性，包括保肝、抗病毒、抗炎、抗氧化、抗过敏、抗糖尿病和抗菌作用。研究已经表明，青蒿琥酯可以抑制细胞的增殖，并抑制在体外和体内的各种肿瘤细胞系，如乳腺癌，肺癌，结肠癌，胰腺癌等，但青蒿琥酯能否抑制肝癌生长报道还是很少。

发明内容

为了克服上述技术缺陷，本发明的目的在于提供了一种青蒿琥酯在制备治疗AKT/mTOR信号通路激活的人肝癌HepG2细胞的药物中的应用，所述青蒿琥酯能够降低p-AKT、p-S6、c-Myc的表达，进而抑制人肝癌HepG2细胞增殖。

PI3K/AKT/mTOR信号通路在肝细胞癌中调节细胞增殖、迁移、存活和血管生成。在高达48％的肝细胞癌中检测到异常的mTOR信号传导，并且已显示不良结果与mTOR信号传导激活之间的相关性。丝氨酸/苏氨酸激酶AKT是细胞调控网络的一个关键角色，并影响大部分的细胞活动，包括生长、存活、运动、分化和代谢。PI3K使AKT活化后生成磷酸化AKT(p-AKT)，能够涉及多种细胞进程，包括促进肿瘤细胞的生存以及促进细胞周期进行。

核糖体蛋白S6是mTOR复合物1(mTORC1)下游的主要效应分子，通常通过其磷酸化水平来反映mTOR信号通路的活性水平。mTOR信号减弱可以导致细胞进一步死亡。c-Myc基因过表达在多种肿瘤中存在，其编码核内磷酸蛋白，属于核蛋白基因，具有DNA结合能力，可以促进DNA修复，在细胞的生长及其分化过程中起到关键的调节作用，当其基因过表达或异常时细胞不可控制的增长恶化。

本发明所述的应用，所述青蒿琥酯是从菊科植物黄花蒿Artemisia annual中提取，分子式为C₁₉H₂₈O₈，为二氢青蒿素-10α-丁二酸单酯，按无水物计算，含C₁₉H₂₈O₈应为98.0％～102.0％，属于白色结晶性粉末，无臭味苦，在乙醇、丙酮或二氯甲烷中易溶，加二氯甲烷使溶解并定量稀释制成每1ml中含25mg的溶液，依法测定，比旋度为+4.5°至+6.5°，pH值为3.5～4.5，其制备熔点为1290℃～1400℃，来源于美国sigma公司。

本发明所述的应用，所述青蒿琥酯的浓度≥25μmol·L^-1，所述药物可以制成液体药物固化颗粒，其制备方法为：