[发明专利]一种弯曲毛细管电泳检测多酶的方法有效
| 申请号： | 201910342854.0 | 申请日： | 2019-04-26 |
| 公开（公告）号： | CN110044988B | 公开（公告）日： | 2021-01-29 |
| 发明（设计）人： | 王建浩;邱琳;崔朋飞;周舒文;朱志兰;柳丽;刘晓骞 | 申请（专利权）人： | 常州大学 |
| 主分类号： | G01N27/327 | 分类号： | G01N27/327;G01N27/447;G01N21/64 |
| 代理公司： | 常州市英诺创信专利代理事务所(普通合伙) 32258 | 代理人： | 谢新萍 |
| 地址： | 213164 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 弯曲 毛细管 电泳 检测 方法 | ||
1.一种弯曲毛细管电泳检测多酶的方法，其特征在于：将量子点与多肽结合形成双酶探针，再将电泳所用的毛细管分别弯曲成不同个数的半圆，固定后，先进样双酶探针，间隔10s后进样水解酶，经荧光光谱仪检测双酶探针的荧光强度；所述的弯曲毛细管为石英毛细管；
所述多肽含有(1)双酶切位点；(2)用于和量子点发生FRET的荧光染料Cy5；(3)和量子点结合的6×组氨酸。
2.根据权利要求1所述的弯曲毛细管电泳检测多酶的方法，其特征在于：所述的水解酶为PreScission蛋白酶和凝血酶。
3.根据权利要求1所述的弯曲毛细管电泳检测多酶的方法，其特征在于：所述多肽含有的双酶切位点为LEVLFQGP和LVPRGS。
4.根据权利要求1所述的弯曲毛细管电泳检测多酶的方法，其特征在于：所述多肽序列为Cy5-D3LEVLFQGPGLVPRGSGP9G2H6。
5.根据权利要求1所述的弯曲毛细管电泳检测多酶的方法，其特征在于：所述量子点为含有Zn的量子点，CdSe/ZnS、CdTe/ZnS、CdSe/ZnSe或CdTe/ZnSe。
6.根据权利要求1所述的弯曲毛细管电泳检测多酶的方法，其特征在于：所述的双酶探针为1μM量子点与8μM多肽等体积混合孵育10min得到。
7.根据权利要求1所述的弯曲毛细管电泳检测多酶的方法，其特征在于：所述的弯曲毛细管的内径为75μm，外径为365μm，弯曲的半圆个数为1-4个，弯曲的直径为3cm。
8.根据权利要求1所述的弯曲毛细管电泳检测多酶的方法，其特征在于，所述的弯曲毛细管为180°等宽圆弧弯曲毛细管。
9.根据权利要求1所述的弯曲毛细管电泳检测多酶的方法，其特征在于，所述双酶探针的进样时间为15s，所述水解酶的进样时间为15s，所述的水解酶进样间隔为10s。
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