[发明专利]一种基于AzMMMan化学修饰的蛋白制备方法

权利要求书

1.一种基于AzMMMan化学修饰的蛋白制备方法，其特征在于：包括以下步骤；

步骤一： AzMMMan化学修饰蛋白和其与相关分子点击化学交联的制备；

S1、有机小分子AzMMMan化学修饰蛋白的制备：利用相关蛋白上侧链氨基与有机小分子AzMMMan的酸酐键在碱性条件下反应，连接形成酰胺键；

S2、由AzMMMan修饰后的蛋白与相关分子点击化学交联的制备：利用AzMMMan修饰后的蛋白上带有的叠氮基团与相关分子上被修饰后带有的二苯基环辛炔在弱碱性条件下发生点击化学反应，连接形成氮杂环；

步骤二：利用AzMMMan化学修饰Protein A得到Protein A-AzM-DBCO-X；利用AzMMMan化学修饰Protein B得到Protein B-AzM-DBCO-Y；

S1、将CAT溶解于pH 9.0的HEPES缓冲溶液中，将由少量乙腈溶解的有机小分子AzMMMan缓慢滴加至改缓冲液中，室温下反应4小时得到CAT-AZ；

S2、将Pt-COOH以少量二甲基亚砜为溶剂，EDC/NHS活化半小时，随后将其加入至有HSA的PBS缓冲溶液中且pH 8.0，避光反应12小时，再加入由少量乙腈溶解的有机小分子AzMMMan，反应4小时得到Pt(IV)-HSA-AZ ；

S3、将CAT-AZ、Pt(IV)-HSA-AZ和DBCO-Ce6 置于pH8.0的PBS缓冲溶液中避光反应4-6小时得到HSAP-DC-CAT。

2.根据权利要求1所述的一种基于AzMMMan化学修饰的蛋白制备方法，其特征在于：所述AzMMMan为2-叠氮甲基或3-甲基马来酸酐。

3.根据权利要求1所述的一种基于AzMMMan化学修饰的蛋白制备方法，其特征在于：所述Protein A-AzM-DBCO-X中的Protein A 代表辅助药物治疗的相关功能蛋白；X代表Ce6等光动力肿瘤治疗药物、顺铂等化疗药物，或者其他治疗方式的肿瘤药物。

4.根据权利要求1所述的一种基于AzMMMan化学修饰的蛋白制备方法，其特征在于：所述Protein B-AzM-DBCO-Y中的Protein B 代表干扰素或白介素等多肽或蛋白药物；Y代表辅助蛋白药物治疗的相关分子。