[发明专利]一种组织中泰乐菌素残留的检测方法

说明书

本发明公开一种组织中泰乐菌素残留的检测方法，属于兽药残留检测领域，所述检测方法包括对照品溶液的制备、供试品溶液的制备，之后采用高效液相色谱法以梯度洗脱的方式将所述标准品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪中，根据紫外法计算泰乐菌素的残留。本发明通过对液相色谱条件的优选及标准品、供试品制备方法的实验，建立了组织中泰乐菌素残留的检测方法；通过方法学验证试验表明：所建立的方法准确度高、专属性强、重现性良好，能有效的检测组织中泰乐菌素的残留。

技术领域

本发明属于兽药残留检测领域，具体涉及各种组织中泰乐菌素残留的检测方法。

背景技术

在我国，畜禽养殖业是非常发达的行业，也是我国的基础行业。随着畜禽养殖业的发展，各种药物的使用也越来越频繁，特别是抗生素的使用，更是涉及到生产各个部分。抗生素不仅能够促进动物生长，还可以防病治病，这使得抗生素使用量随之增加。但是随着抗生素使用的越来越多，产生的抗生素滥用问题也就越来越严重，这也是当下亟待解决的问题。抗生素经过口服、注射等方式进入动物体内，然后经过肠道等的吸收，血液将抗生素带到全身或是靶部位，最后通过肝脏、肾脏、胰腺等代谢出体外。在整个过程中，泰乐菌素在动物体内能够起到不同的作用。但是，抗生素在动物体内的过程可能出现残留，这是对人类或环境都是有非常大的危害的。抗生素残留在动物体内，当作用于动物体内的病菌时，如果未达到杀死细菌的的最低浓度，很可能是细菌出现突变而产生更严重的耐药性；如果人类食用了有抗生素残留的动物制品，会积累抗生素对人体的伤害，很多抗生素对人体都是有很大的副作用的，也会有产生耐药基因的可能；再则抗生素在进入环境后，对水中或是土壤中的微生物也会产生影响，破坏生态环境。

泰乐菌素(Tylosin)，亦称泰农、泰乐霉素，是美国于1959年从弗氏链霉菌的培养液中获得的一种大环内酯类抗生素。酒石酸泰乐菌素分子式为2(C₄₆H₇₇NO₁₇)·C₄H₆O₆，分子量为1982.31，为白色或淡黄色粉末，易溶于水。因其肠道吸收好，体内扩散快，血药浓度高，在临床上多用于治疗药物使用。其临床应用方法较多，如片剂口服、粉剂饮水、肌肉注射、皮下注射、混饲给药、喷雾药浴等。泰乐菌素是一类动物专用抗生素，目前已经广泛的用于我国的畜禽生产行业，也是国际上使用最多的兽用抗生素之一。泰乐菌素的使用，不仅能够作为饲料添加剂促进动物的生长，更可以用来防治动物各种病原菌的感染，提高生产性能。据国家农业部统计，目前国际市场对泰乐菌素的年需求量在15000吨左右，我国的需求量在200吨左右。如此大量的使用在动物身上，既是对我国畜禽业的方法有很大的帮助，但也会带来很多的问题。

由于泰乐菌素在畜禽生产中的大量使用，泰乐菌素在动物体内的残留也成为动物食品安全的很大问题。为了能够减少动物组织中的泰乐菌素残留、提防细菌耐药性的出现、保障人类生活食品的安全，必须建立起检测动物组织中泰乐菌素残留的检测方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种组织中泰乐菌素残留的检测方法，以解决上述现有技术存在的问题，以提高检测效率、降低检测限、简化检测程序。

本发明提供一种组织中泰乐菌素残留的检测方法，包括以下步骤：

步骤1、制备供试品样品：

(1)将称量好的组织用淋洗溶剂淋洗，匀浆，提取，涡旋，超声，离心处理，得到上清液；

(2)重复上述提取步骤一次，第二次离心处理，合并两次上清液；

(3)在步骤(2)得到的上清液中加入蛋白沉淀剂，涡旋，离心，取上清液，蒸干，得到残渣；

(4)用有机溶剂溶解步骤(3)中的残渣两次，合并两次溶解液；

(5)HLB固相萃取小柱净化；