[发明专利]能有效减少种子形成的基因及其在培育无核植物中的应用在审
| 申请号: | 201910318951.6 | 申请日: | 2019-04-19 |
| 公开(公告)号: | CN109880833A | 公开(公告)日: | 2019-06-14 |
| 发明(设计)人: | 徐炎;张晨;焦韵桐;李志谦;郝新意 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
| 主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/88;A01H6/82 |
| 代理公司: | 北京亿腾知识产权代理事务所(普通合伙) 11309 | 代理人: | 陈霁 |
| 地址: | 712100 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 有效减少 基因 碱基序列 体内表达 同源性 培育 应用 | ||
本说明书实施例提供了一种能有效减少种子形成的基因及其在培育无核植物中的应用。所述基因在植物体内表达能有效减少种子形成;所述基因为如下(1)或(2)的DNA片段;(1)、碱基序列如SEQ ID NO:1所示的DNA片段;(2)、与(1)中DNA片段具有至少80%同源性、且具有(1)中DNA片段功能的DNA片段。
技术领域
本说明书一个或多个实施例涉及植物组培技术领域,尤其涉及一种能有效减少种子形成的基因及其在培育无核植物中的应用。
背景技术
无籽育种是瓜果育种的一个重要方向,现在已经有很多无籽瓜果投放市场,例如无籽西瓜、无籽葡萄、无籽猕猴桃等。目前,大部分的无籽瓜果是通过培育三倍体或诱导单性结实形式获得。
通过三倍体或诱导单性结实来培育无籽瓜果,培育时间较长,成本较高。
发明内容
本说明书一个或多个实施例描述了一种能有效减少种子形成的基因及其在培育无核植物中的应用。
根据第一方面,提供了一种分离的基因,所述基因在植物体内表达能有效减少种子形成;
所述基因为如下(1)或(2)的DNA片段;
(1)、碱基序列如SEQ ID NO:1所示的DNA片段;
(2)、与(1)中DNA片段具有至少80%同源性、且具有(1)中DNA片段功能的DNA片段。
在一种可能的实现方式中,所述植物为葡萄或番茄。
根据第二方面,提供了一种如第一方面所述的基因编码的蛋白质,所述蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
根据第三方面,提供了一种重组表达载体,包括第一方面所述的基因。
根据第四方面,提供了一种宿主细胞,所述宿主细胞含有如第三方面所述的重组表达载体,或所述宿主细胞基因组中整合有外源的如第一方面所述的基因。
根据第五方面,一种用于扩增如第一方面所述的基因的引物对,所述引物对中的上游引物如SEQ ID NO:3所示,所述引物对中的下游引物如SEQ ID NO:4所示。
根据第六方面,提供了一种如第一方面所述的基因的制备方法,包括如下步骤:
提取无核葡萄胚珠中的RNA,并以提取的RNA为模版,进行逆转录,得到cDNA;
以所述cDNA为模版,SEQ ID NO:3所示的序列为上游引物,SEQ ID NO:4所示的序列为下游引物,进行扩增,以得到所述基因。
在一种可能的实现方式中,所述提取无核葡萄胚珠中的RNA,并以提取的RNA为模版,进行逆转录,得到cDNA,包括:
分别提取花后20天、花后30天、花后40天、花后50天的胚珠的RNA,并分别进行逆转录,分别得到花后20天、花后30天、花后40天、花后50天胚珠cDNA;
以所述cDNA为模版,SEQ ID NO:3所示的序列为上游引物,SEQ ID NO:4所示的序列为下游引物,进行扩增,以得到所述基因,包括:
以花后20天、花后30天、花后40天、花后50天胚珠cDNA的混合物为模版,进行扩增,以得到所述基因。
根据第七方面,提供了一种减少植物种子形成的方法,所述方法包括:
将第三方面所述的重组表达载体导入到植物中,或将第一方面所述的基因整合至植物的基因组中。
在一种可能的实现方式中,所述植物为番茄或葡萄;
所述将第三方面所述的重组表达载体导入到植物中,包括:
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