[发明专利]一种用于检测人VEGF蛋白表达水平的体外试剂盒有效
申请号: | 201910268089.2 | 申请日: | 2019-04-03 |
公开(公告)号: | CN110133278B | 公开(公告)日: | 2022-05-17 |
发明(设计)人: | 吕鹏辉 | 申请(专利权)人: | 浙江众意生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K16/22 | 分类号: | C07K16/22;G01N33/68;G01N33/574;G01N33/577 |
代理公司: | 杭州橙知果专利代理事务所(特殊普通合伙) 33261 | 代理人: | 李品 |
地址: | 311100 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 vegf 蛋白 表达 水平 体外 试剂盒 | ||
1.一种用于检测人VEGF蛋白表达水平的体外试剂盒,其特征在于,将VEGF抗体包被板制成固相抗体,往包被抗体的微孔中依次加入样品,再加入HRP标记的酶标液,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色,TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在终止液作用下转化为黄色,颜色深浅与VEGF抗原含量成正相关,利用酶标仪测定450nm波长下OD,通过标曲计算VEGF含量,所述检测试剂盒包含新型人源化VEGF单抗,所述VEGF抗体包括:
SEQ ID NO:07的氨基酸序列的CDR-L1,
SEQ ID NO:08的氨基酸序列的CDR-L2,
SEQ ID NO:09的氨基酸序列的CDR-L3,
SEQ ID NO:10的氨基酸序列的CDR-H1,
SEQ ID NO:11的氨基酸序列的CDR-H2,
SEQ ID NO:12的氨基酸序列的CDR-H3,
所述VEGF抗体的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:25所示,轻链可变区氨基酸序列如SEQID NO:26所示。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述VEGF抗体为人源化抗体,
或,所述VEGF抗体为人源化单克隆抗体。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述VEGF抗体包含选自人抗体IgG1、IgG2、IgG3、IgG4的任一Fc端的氨基酸序列。
4.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述VEGF抗体的生产步骤包括:在培养基中和合适的培养条件下培养含有权利要求1-3所述抗体的宿主细胞,从培养基中或从所培养的宿主细胞中回收产生的抗体及其抗体片段。
5.根据权利要求1-4任一项所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包含酶标包被板、标品、标品缓冲剂、酶标液、样品稀释液、TMB显色剂、洗涤液、终止液。
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