[发明专利]一种抗迟缓爱德华氏菌的TAT-EseD重组蛋白及用途

说明书

本发明公开了一种抗迟缓爱德华氏菌的TAT‑EseD重组蛋白及用途，抗迟缓爱德华氏菌的TAT‑EseD重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的抗迟缓爱德华氏菌的TAT‑EseD重组蛋白，其中的TAT可以携带EseD蛋白进入细胞，增强EseD蛋白作为亚单位疫苗的免疫水平，显著提高激发EseD蛋白特异性细胞毒性淋巴细胞反应水平，对于海水养殖鱼类迟缓爱德华氏菌病有更高、更长久的保护效果；利用大肠杆菌表达TAT‑EseD重组蛋白，表达量大，操作简单，成本低，安全性好。

技术领域

本发明属于基因生物工程技术领域，具体涉及一种抗迟缓爱德华氏菌的TAT-EseD重组蛋白及用途。

背景技术

迟缓爱德华氏菌病主要是由迟缓爱德华氏菌感染引起的，在各个重要的经济鱼类如大菱鲆、褐牙鲆、日本鳗鲡和斑点叉尾鮰等都有该病害报道。该病害爆发能引起大量鱼类死亡，对养殖业造成严重的经济损失。

迟缓爱德华氏菌病至今没有有效的药物，主要以预防为主。但是在实际的养殖生产中，养殖鱼类发生疾病时，滥用、错用渔药的情况十分普遍。长期滥用药物不仅使药物的效果受到了限制，还可诱发病原微生物产生抗药性，导致“无药可用”，更严重的是药物在养殖动物体内残留和养殖环境的进一步污染。随着人们对食品安全和环境安全的重视，消除水产品药物残留隐患的抗病技术研究已显得尤为重要。疫苗作为抗生素的替代品，可使鱼类高特异抵御病原的攻击，减少鱼类病害的发生，保护生态环境，可以说鱼类疫苗的开发和应用具有重要而深远的意义。

鱼类疫苗根据制作工艺的不同，可以分为灭活疫苗、活菌疫苗(弱、减毒疫苗)和基因工程疫苗。灭活疫苗和活菌疫苗是利用物理或化学方法处理病原，使其失活或失去致病力，这种疫苗的优点是制备简单，免疫保护效果较好，但是存在着免疫力不持久和毒力会回复等缺陷。随着生物学技术的发展，基因工程疫苗的优势受到大家的关注。基因工程疫苗是利用基因工程的方法改造或重组病原体基因获得重组蛋白、质粒或完整病原体所构成的新型疫苗。

能刺激动物机体产生抗体和效应性淋巴细胞并能与之结合引起特异性免疫反应的物质被称为抗原。作为微生物抗原的细菌，其结构比较复杂，可以看做是由多种抗原成分构成的复合体。

EseD分子量约为21.1kD，不含信号肽，为亲水性蛋白，是迟缓爱德华氏菌具有显著性保护效应的抗原蛋白之一，能够诱导鱼体产生特异性抗体。TAT是艾滋病病毒(HIV-1)的反式转录激活催化剂，已经成功地携带多肽、荧光标记蛋白、DNA及小分子药物等，实现体内外的跨膜递送。

但目前尚未有用TAT和EseD制备重组蛋白制成预防海水养殖鱼类迟缓爱德华氏菌感染疫苗的报道。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种抗迟缓爱德华氏菌的TAT-EseD重组蛋白。

本发明的第二个目的是提供一种编码抗迟缓爱德华氏菌的TAT-EseD重组蛋白的基因。

本发明的第三个目的是提供一种含有编码抗迟缓爱德华氏菌的TAT-EseD重组蛋白的基因的重组基因工程菌。

本发明的第四个目的是提供抗迟缓爱德华氏菌的TAT-EseD重组蛋白在制备抗迟缓爱德华氏菌病疫苗中的用途。

本发明的技术方案概述如下：

一种抗迟缓爱德华氏菌的TAT-EseD重组蛋白，所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQID NO.2所示。

编码抗迟缓爱德华氏菌的TAT-EseD重组蛋白的基因，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。