[发明专利]美洲大蠊多肽的制备方法

说明书

本发明属于多肽制备技术领域，具体涉及一种美洲大蠊多肽的制备方法，包括：提供美洲大蠊，将美洲大蠊进行脱脂处理，然后采用65％‑85％乙醇水溶液作为提取液进行成分提取，收集提取液，浓缩，获得总提取物；将总提取物与水进行混合均匀，过滤，收集滤液；将滤液上大孔树脂柱进行梯度洗脱，梯度洗脱采用的流动相包括：水、70％‑80％醇水溶液和至少一个质量百分比浓度低于70％的醇水溶液，然后收集70％‑80％醇水溶液的洗脱液，并浓缩至洗脱液体积的0.1倍以下，获得浓缩液；将浓缩液与有机溶剂进行混合，进行萃取，收集有机溶剂萃取液，并将有机溶剂萃取液进行结晶，收集晶体，干燥；有机溶剂为乙酸乙酯和石油醚的混合溶剂，且乙酸乙酯和石油醚的混合体积比为(1‑5):1。

技术领域

本发明属于多肽制备技术领域，具体涉及一种美洲大蠊多肽的制备方法。

背景技术

美洲大蠊，为昆虫纲蜚蠊目蜚蠊科大蠊属昆虫，俗称蟑螂，我国历代本草专著如《本草纲目》、《新修本草》中均有详细记载，近代多部药学专著和学术文献中也有研究和记述。美洲大蠊，烘干入药，具有较高的药用价值，有200多种重要成分与其相配，作为中药，其性寒、味咸、且有微毒，能入三经、逐瘀破血、接骨续筋、消肿止痛等功效，主治腰腿痛、跌打损伤、关节炎等病症。现代医学证明，美洲大蠊对白血病有治疗作用，并且能抑制肿瘤的扩散，对某些癌症具有一定的治疗作用有散瘀解毒、抗菌消肿、保肝利水、增强免疫及抗肿瘤等功效。

美洲大蠊主要活性成分包括多肽、挥发油、氨基酸、多糖类、脂肪、有机酸及生物碱，机体内含有铁、锌、锰、铜等8种人体必需微量元素，还含有17种氨基酸，缬氨酸、亮氨酸等必须氨基酸以及20多种非必须氨基酸等。美洲大蠊多肽作为一类具有抗菌活性的碱性多肽物质，是由大蠊脑神经分泌细胞分泌的，对生长、变态、生殖、动态平衡等生理过程起调节作用的多肽类物质，这类活性多肽具有广谱抗菌、稳定性好、分子量较小，抗炎，抗氧化，增强免疫力及促进伤口愈合等药理作用，并且能够在不伤害正常细胞、组织的前提下选择性杀伤肿瘤细胞，不产生毒副反应，是美洲大蠊中最有效的成分之一。

目前对美洲大蠊多肽的开发还处于初级阶段，采用传统方法制备得到的美洲大蠊多肽纯度低，杂质多，色泽深，并存在一定程度的腥臭味，这限制了美洲大蠊多肽的进一步应用。

发明内容

有鉴于此，本发明的主要目的在于提供一种美洲大蠊多肽的制备方法，旨在解决现有方法得到的美洲大蠊多肽纯度低的技术问题。

为了实现上述发明目的，本发明提供了一种美洲大蠊多肽的制备方法，包括如下步骤：

提供美洲大蠊，将所述美洲大蠊进行脱脂处理，然后采用40％-90％乙醇水溶液作为提取液进行成分提取，收集提取液，浓缩至密度为1.10-1.15g/mL，获得总提取物；

提供水，将所述总提取物与所述水混合，进行水沉，随后过滤，并收集滤液；将所述滤液上大孔树脂柱进行梯度洗脱，所述梯度洗脱采用的流动相包括：水、70％-80％醇水溶液和至少一个质量百分比浓度低于70％的醇水溶液，然后收集所述70％-80％醇水溶液的洗脱液，并浓缩至所述洗脱液体积的0.1以下，获得浓缩液；

将所述浓缩液与有机溶剂混合，进行萃取，收集有机溶剂萃取液，并浓缩所述有机溶剂至晶体析出，然后静置于10℃以下的环境中自然析晶，过滤，收集晶体，干燥，即得；

其中，所述有机溶剂为乙酸乙酯和石油醚的混合溶剂，且所述乙酸乙酯和所述石油醚的混合体积比为(2-5):1。

在本发明美洲大蠊的制备方法中，将所述美洲大蠊进行脱脂处理，并采用40％-90％乙醇水溶液作为提取液对经过脱脂处理的美洲大蠊进行成分提取，然后采用大孔树脂富集活性成分，并采用乙酸乙酯和石油醚的混合溶剂作为萃取溶剂，之后于10℃以下的环境中自然析晶，进而制备获得了纯度高且颜色纯白的美洲大蠊多肽。本发明方法操作简单，工艺优化，可获得高纯度的美洲大蠊多肽，适合工业化大规模生产。

附图说明