[发明专利]一种应用SiO2

说明书

本发明公开一种应用SiO₂@松香基高分子色谱柱分离天麻素及其衍生物的方法，以甲基丙烯酸甲酯为单体，丙烯海松酸丙烯酸乙二醇酯为交联剂，与引发剂混合均匀后涂覆到硅胶表面，然后使其进行自由基聚合反应得到SiO₂@松香基高分子微球。将SiO₂@松香基高分子微球用湿法装柱制备色谱柱，采用制得的色谱柱对天麻素及其衍生物进行HPLC分离，检测波长：220nm，温度35±10℃，流速0.3‑1.0mL/min，对天麻素和苯基β‑D‑吡喃葡萄糖苷的分离度为6.29以上，对天麻素与4‑甲氧基苯基β‑D吡喃葡萄糖苷的分离度为9.09以上，对苯基β‑D‑吡喃葡萄糖苷和4‑甲氧基苯基β‑D‑吡喃葡萄糖苷的分离度达到了7.14，可见本发明对天麻素及其衍生物具有较高的分离度和选择性。

技术领域

本发明属于高效液相色谱法领域，具体涉及一种应用SiO₂@松香基高分子色谱柱分离天麻素及其衍生物的方法。

背景技术

天麻素及衍生物苯基β-D吡喃葡萄糖苷、4-甲氧基苯基β-D吡喃葡萄糖苷的化学结构式分别为：

天麻素：苯基β-D吡喃葡萄糖苷：4-甲氧基苯基β-D吡喃葡萄糖苷：

天麻素是天麻的有效成分之一，具有增强免疫、镇痛的功效，可用于治疗心脑血管疾病、小儿惊风、破伤风等病症，疗效显著。苯基β-D吡喃葡萄糖苷、4-甲氧基苯基β-D吡喃葡萄糖苷是重要的药物合成中间体，与天麻素结构相似，极性相差也小，因此，将天麻素与其衍生物分离开来，有重要意义。

目前，关于天麻素及其衍生物高效液相色谱分离法的报道，我们查到如下一些文献：

1.申请号：201610998945.6，发明名称：一种酯化修饰的松香基高分子色谱柱分离天麻素的方法，其中提到用酯化修饰的松香基高分子色谱柱分离天麻素及其衍生物4-甲氧基苯基β-D-吡喃葡萄糖苷，检测波长：220～280nm，温度30±10℃，流速0.3～1.0mL/min，对天麻素和4-甲氧基苯基β-D-吡喃葡萄糖苷进行分离，分离度为1.97-2.41。

2.申请号：201710710292.1，发明名称：一种弱极性松香基高分子微球及其制备方法和应用，其中提到用弱极性松香基高分子微球分离天麻素和苯基β-D-吡喃葡萄糖苷，流动相：甲醇，检测波长：265nm，温度28℃，流速为0.35mL/min，分离度为1.6。

3.刘玉红,易进海,陈燕,黄志芳,刘云华.RP-HPLC法同时测定天麻中游离天麻素、巴利森苷和总天麻素[J].中成药,2012,34(01):182-184.其中色谱柱为LUNA C₁₈(4.6mm×150mm，5 μm)，流动相为甲醇-1％冰醋酸，梯度洗脱，流速0.8mL/min，柱温35℃，检测波长270nm。

然而，上述方法对天麻素及其衍生物的分离效果不太理想，因此有必要探索一种更为高效的分离天麻素及其衍生物的方法。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供一种应用SiO₂@松香基高分子色谱柱分离天麻素及其衍生物的方法，该方法对天麻素及其衍生物具有较高的分离度和选择性，且该方法灵敏度高，操作简单，快速高效，环境友好。

本发明的技术方案如下：

一种应用SiO₂@松香基高分子色谱柱分离天麻素及其衍生物的方法，将SiO₂@松香基高分子微球作为固定相填料，采用湿法装柱制备得到SiO₂@松香基高分子色谱柱；将核壳型 SiO₂@松香基高分子色谱柱接入液相色谱仪，设置液相色谱仪的流动相流速为0.3-1.0mL/min，检测波长220nm，柱温箱35±10℃；启动进样阀使流动相将天麻素及其衍生物带入SiO₂@松香基高分子色谱柱中，实现天麻素及其衍生物的分离。