[发明专利]肿瘤疫苗及其制备方法和用途

说明书

本发明涉及肿瘤疫苗及其制备方法和用途，属于医药领域。本发明提供了肿瘤疫苗，它是将乳酸刺激的肿瘤细胞灭活制备得到的。本发明还提供了所述肿瘤疫苗的制备方法和用途。小鼠移植瘤模型实验证明，本发明采用乳酸刺激肿瘤细胞得到的疫苗在预防性及治疗性实验中均显示出显著的抗肿瘤作用，能够抑制肿瘤的生长，延长实验小鼠的生存时间，提高生存率，且效果明显优于未经乳酸刺激的灭活肿瘤细胞。本发明为临床防治肿瘤提供了新的用药选择，也提供了新的肿瘤治疗策略。

技术领域

本发明涉及肿瘤疫苗及其制备方法和用途，属于医药领域。

背景技术

肿瘤疫苗的研究已有数十年，目前被认为是一种有效的抗肿瘤疗法。近年的研究尝试了多种不同的疫苗来源，包括DNA疫苗、蛋白和抗原特异性多肽疫苗、细菌或病毒载体疫苗、肿瘤全细胞疫苗等。免疫系统可通过独特的肿瘤相关抗原(TAAs)识别肿瘤，该抗原可促进免疫系统识别肿瘤并增强抗肿瘤治疗。与单一靶向的疫苗相比，肿瘤细胞可提供全系列的TAAs，其中含有CD8+细胞毒性T淋巴细胞和CD4+辅助T细胞的抗原决定簇，并可以同时激活固有免疫应答和获得性免疫应答。此外，肿瘤全细胞疫苗可通过CD4+ T细胞促进产生长期的CD8+ T淋巴细胞记忆，并增强抗肿瘤反应，相比单个决定簇的疫苗，它也可以极大降低肿瘤逃逸免疫反应的机会。并且肿瘤全细胞疫苗能提供所有肿瘤抗原，避免抗原丢失。目前有数种全肿瘤疫苗，包括：肿瘤源性的外泌体、死亡的肿瘤全细胞、肿瘤全细胞坏死溶解产物、辐照肿瘤全细胞疫苗、病毒溶瘤产物、树突状细胞/肿瘤融合疫苗、全肿瘤RNA递呈的树突状细胞，另外还可以通过氧化修饰增强坏死的肿瘤全细胞的免疫原性。

在不同氧浓度下的正常细胞其葡萄糖糖代谢通过不同途径产生三磷酸腺苷(ATP)以及乳酸或二氧化碳。即使在氧气充足的条件下，肿瘤细胞倾向于通过糖酵解代谢葡萄糖。相对于氧化磷酸化反应，糖酵解产生ATP效率更低。该过程导致肿瘤组织中乳酸浓度高于正常组织。乳酸作为肿瘤代谢中的重要副产物，其浓度在肿瘤组织内高达40mmol/L。既往研究发现，乳酸在肿瘤中的作用包括：促进转移、抑制抗免疫反应以及增加血管生成。

迄今，尚未见乳酸能够抑制肿瘤生长的相关报道，更未见乳酸刺激肿瘤细胞制备的肿瘤疫苗。

发明内容

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的目的在于提供肿瘤疫苗。本发明的另一目的在于提供所述肿瘤疫苗的制备方法和用途。

本发明提供了肿瘤疫苗，它是将乳酸刺激的肿瘤细胞灭活制备得到的。

进一步地，所述乳酸刺激的肿瘤细胞是将乳酸与肿瘤细胞混合培养得到的。

进一步地，于二氧化碳细胞培养箱中培养所述肿瘤细胞。

进一步地，培养时间为19.2～28.8h。

优选地，培养时间为24h。

进一步地，所述乳酸的浓度在5mmol/L以上。

优选地，所述乳酸的浓度在20mmol/L以上。

优选地，所述乳酸的浓度为5～30mmol/L。

优选地，所述乳酸的浓度为20mmol/L。

进一步地，所述肿瘤细胞为淋巴瘤细胞或乳腺癌细胞。

优选地，所述淋巴瘤细胞为T细胞淋巴瘤细胞。

进一步地，所述灭活为辐照灭活。

优选地，所述辐照灭活为X射线辐照灭活。

优选地，所述X射线的工作电压为220kV，电流为40mA。

优选地，当所述肿瘤细胞为T细胞淋巴瘤细胞时，辐照剂量为75Gy。优选

地，当所述肿瘤细胞为乳腺癌细胞时，辐照剂量为50Gy。