[发明专利]一种细菌纤维素提纯分离的方法

权利要求书

1.一种细菌纤维素纯化分离的方法，该方法在未使用碱性溶剂的前提下对细菌纤维素进行纯化分离处理，通过溶菌酶作用使其细菌的细胞壁分解、破裂，再经表面活性剂辅以超声处理加速细菌细胞膜破裂易于分离去除细菌残体，最后，经反复清洗除去菌体获得无细菌及内毒素的细菌纤维素；其特征在于，该方法的步骤如下：

步骤1)：以pH为6.5的三羟甲基氨基甲烷溶液为溶剂，配制溶菌酶溶液，并与乙二胺四乙酸或胰蛋白酶溶液等体积均匀混合配制成溶菌酶混合溶液，备用；其中，溶菌酶溶液的质量体积浓度为0.5g/L，乙二胺四乙酸溶液的质量体积浓度为1.0g/L，或是胰蛋白酶质量浓度为2.5％；

步骤2)：将培养3-5天的细菌纤维素水凝胶取出，浸泡在去离子水中10-12h，更换去离子水，反复多次，直至细菌纤维素内部培养基和杂质被去离子水 置换出来；

步骤3)：将步骤2)处理后的细菌纤维素水凝胶浸泡在步骤1)制得的溶菌酶混合溶液中，其中，细菌纤维素与溶菌酶混合溶液的质量体积浓度为0.05-0.25g/mL；置于摇床进行振荡，摇床转速范围为100-200r/min，温度为30-40℃，浸泡振荡时间为3-12h；

步骤4)：将步骤3)获得的细菌纤维素水凝胶浸泡在表面活性剂中进行超声使细菌细胞膜破解充分，超声时间为3-6h，超声功率为100-300W；

步骤5)：将步骤4)获得的细菌纤维素水凝胶多次清洗，去除细菌纤维素内部残留的表面活性剂，制备出纯化的细菌纤维素水凝胶。

2.根据权利要求1所述细菌纤维素纯化分离的方法，其特征在于，所述表面活性剂包括Triton X-100、TWEEN-20、Span-80及烷基糖苷中的一种。