[发明专利]一种吲哚-3-甲醇和3;3`-二吲哚甲烷的同时提取方法

说明书

本发明提供了一种吲哚‑3‑甲醇和3,3'‑二吲哚甲烷的同时提取方法，属于植物提取领域。本发明将十字花科蔬菜的可食性器官的新鲜样品破碎，得到新鲜样品后真空冷冻干燥后粉碎，得到干燥样品，将新鲜样品或干燥样品分别与柠檬酸‑磷酸盐缓冲溶液混合后进行酶解反应，得到酶解液用乙酸乙酯萃取后，将所得上清液进行蒸干，得到提取物与磷酸二氢钾‑磷酸氢二钾缓冲溶液混合后，再加入乙醇使吲哚‑3‑甲醇饱和，静置，得到3,3'‑二吲哚甲烷溶液和吲哚‑3‑甲醇提取物，分别蒸发，得到3,3'‑二吲哚甲烷和吲哚‑3‑甲醇。本发明以十字花科蔬菜的可食性器官为原料，实现了吲哚‑3‑甲醇和3,3'‑二吲哚甲烷的同时提取。

技术领域

本发明涉及植物提取技术领域，特别涉及一种吲哚-3-甲醇和3,3′-二吲哚甲烷的同时提取方法。

背景技术

吲哚-3-甲醇(indole-3-carbinol，I3C)分子式为C₉H₉NO，分子量147.18。研究发现，3-吲哚甲基硫代葡萄糖苷主要存在于十字花科蔬菜中，包括甘蓝、花椰菜、大白菜等，在合适的pH值条件下，吲哚甲基硫代葡萄糖苷能够和内源性的黑芥子酶反应水解生成吲哚-3-甲醇。自1978年Wattenberg和Loub首次报道了吲哚-3-甲醇可以抑制多环芳烃诱导大鼠肿瘤细胞的形成以来，越来越多的研究表明吲哚-3-甲醇可以通过抑制致癌物质与DNA的结合，修复DNA损伤，造成细胞凋亡等途径来抑制乳腺癌、宫颈癌、前列腺癌、结肠癌的发生。

吲哚-3甲醇不稳定，很容易形成二聚体3,3′-二吲哚甲烷(DIM)或在人体肠道内形成多种寡聚物，其中DIM具有重要的抗肿瘤功效。3,3′-二吲哚甲烷，又名二聚吲哚，是一种化学品，化学式是C₁₇H₁₄N₂，分子量246.31。研究发现，I3C及其二聚体DIM可修复DNA损伤，其机制可能与雌激素受体-α(ER-α)有关，同时可以通过影响人类乳腺癌易感基因BRCA1来修复相关蛋白(RAD51)等。I3C和DIM可参与多种转录因子的调控途径来排出致癌物，进行DNA损伤修复，造成癌细胞细胞凋亡等过程，在预防和降低乳腺癌、子宫癌等多种癌症方面具有明显的功效。现有技术中还没有吲哚-3-甲醇和3,3′-二吲哚甲烷的同时提取方法的相关报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种吲哚-3-甲醇和3,3′-二吲哚甲烷的同时提取方法。本发明提供了一种吲哚-3-甲醇和3,3′-二吲哚甲烷的同时提取方法，简化了提取方法。

本发明提供了一种吲哚-3-甲醇和3,3′-二吲哚甲烷的同时提取方法，包括以下步骤：

将十字花科蔬菜的可食性器官的新鲜样品破碎，得到新鲜样品；

将所述新鲜样品真空冷冻干燥后粉碎，得到干燥样品；

将所述新鲜样品或干燥样品分别与柠檬酸-磷酸盐缓冲溶液混合后进行酶解反应，得到酶解液；

将所述酶解液用乙酸乙酯萃取后，将所得上清液进行蒸干，得到提取物；

将所述提取物与磷酸二氢钾-磷酸氢二钾缓冲溶液混合后，再加入乙醇使吲哚-3-甲醇饱和，静置，得到3,3′-二吲哚甲烷溶液和吲哚-3-甲醇提取物，分别将所述3,3′-二吲哚甲烷溶液和吲哚-3-甲醇提取物蒸发，得到3,3′-二吲哚甲烷和吲哚-3-甲醇。

优选地，所述十字花科蔬菜包括甘蓝、青花菜、芥蓝和苤蓝中的一种或多种。

优选地，所述可食性器官包括根、茎、叶、花球和种子中的一种或多种。

优选地，所述新鲜样品与柠檬酸-磷酸盐缓冲溶液的料液比为1:20～1:30g/mL，所述干燥样品与柠檬酸-磷酸盐缓冲溶液的料液比为1:40～1:60g/mL。

优选地，所述真空冷冻干燥的压力为10～15Pa，温度为-45～-80℃，时间为3～6天。