[发明专利]一种A型口蹄疫病毒的可视化快速检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明提供了一种A型口蹄疫病毒的可视化快速检测试剂盒及其制备方法，属于病毒检测技术领域。A型口蹄疫病毒的可视化快速检测试剂盒，包括包被酶标板、洗涤液、血清稀释液、底物显色液、酶标二抗、终止液、阳性标准品和阴性标准品，所述包被酶标板中包被有A型口蹄疫病毒抗体；所述A型口蹄疫病毒抗体的稀释倍数为1:1000～2000。所述试剂盒能实现在室温下可视化检测，具有操作简便、快速的特点，适合于在实验外环境中检测，为A型口蹄疫病毒的快速检测提供可靠的技术手段。所述可视化快速检测试剂盒在A型口蹄疫诊断中的应用。

技术领域

本发明属于病毒检测技术领域，具体涉及一种A型口蹄疫病毒的可视化快速检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

口蹄疫是一种由口蹄疫病毒(FMDV)所致的急性的、热性的、高度接触性传染病，主要侵害偶蹄兽，经常在羊、牛、猪等动物中传播。发病时易感动物的唇和蹄部出现水疱，同时伴有发烧、食欲不振等症状，患病动物体重和产奶量大幅下降。口蹄疫病毒易通过空气传播，传染性强，流行快速，易感动物在抵抗力较弱的情况下也会导致死亡，给养殖户造成巨大的经济损失，严重阻碍了养殖业的发展。

目前对于A型口蹄疫病毒的诊断只能在实验室内完成，因为检测过程需依赖大型检测仪器得到检测结果，同时检测方法繁琐，对操作人员要求较高，不能满足基层对A型口蹄疫病毒的快速、简便的要求。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种A型口蹄疫病毒的可视化快速检测试剂盒及其制备方法，所述检测试剂盒能够通过肉眼观察得到A型口蹄疫病毒是否存在的检测结果，实现快速简便的要求。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种A型口蹄疫病毒的可视化快速检测试剂盒，包括包被酶标板、洗涤液、血清稀释液、底物显色液、酶标二抗、终止液、阳性标准品和阴性标准品，所述包被酶标板中包被有A型口蹄疫病毒抗体；所述A型口蹄疫病毒抗体的稀释倍数为1:1000～2000。

优选的，所述洗涤液为含体积浓度0.01％～0.05％吐温-20的1mol/L的磷酸盐缓冲液；所述洗涤液的pH值为7.2。

优选的，所述血清稀释液含质量浓度为40～50g/L脱脂奶粉的1mol/L磷酸盐缓冲液。

优选的，所述底物显色液为含有体积浓度1％～2％过氧化氢的1mol/L四甲基联苯胺溶液。

优选的，所述终止液为质量浓度1％的十二烷基硫酸钠(SDS)水溶液。

优选的，所述酶标二抗的稀释倍数为1：20000～30000。

本发明提供了所述可视化快速检测试剂盒的制备方法，包括包被酶标板的制备方法；

所述包被酶标板的制备方法，包括以下步骤：

1)将A型口蹄疫病毒抗体稀释后得到抗体稀释液；

2)将抗体稀释液加入酶标板中的每个孔中，在20～25℃条件下进行一次孵育1～2h；

3)将一次孵育后的酶标板洗涤3～4次，加入封闭液封闭，在20～25℃条件进行二次孵育20min；

4)将二次孵育的酶标板洗涤3～4次，晾干，得到包被酶标板。

优选的，所述抗体稀释液加入酶标板中的每个孔中的体积为100μl。

优选的，所述封闭液为质量浓度1～2％的小牛血清蛋白水溶液；所述封闭液的添加体积为100μl/孔。