[发明专利]一种强化烟叶发酵过程的方法

说明书

本发明公开一种强化烟叶发酵过程的方法，使用解淀粉芽孢杆菌GZU03制剂对用于发酵过程的烟叶进行处理，所述解淀粉芽孢杆菌GZU03制剂包括解淀粉芽孢杆菌GZU03，所述解淀粉芽孢杆菌GZU03已于2018年11月9日在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC M 2018762。本发明解淀粉芽孢杆菌GZU03制剂，可以强化烟草梗丝的发酵过程，具有增加烟香、柔和烟气，增加细腻性，降低刺激性，明显改善烟气质和提高口含烟的实用安全性的作用。同时，本发明还公开了一种用于在烟叶发酵过程中提高蛋白酶和淀粉酶活性的方法。

技术领域

本发明属于微生物与烟草加工技术领域，具体地说涉及一种强化烟叶发酵过程的方法。

背景技术

无烟气烟草制品(Smokeless tobacco products，STPs)不发生烟草燃烧过程，不会产生有害裂解产物，无烟气产生，可以在公共场所使用，是低害环保型新型烟草制品的一种重要形式。

口含烟是STPs的重要组成，是目前市场份额增长最快的产品类别，受到世界各主要烟草企业的关注，并在该领域投入大量的资金和精力进行相关的研发工作。

口含烟制品一般是以烟草粉末的形式在口腔中使用，烟草中的成分溶出后通过口腔黏膜吸收。烟叶是口含烟的核心材料，其品质直接决定着口含烟产品的风味特色和使用安全性，从而影响消费市场对产品的接收程度。

微生物发酵是改善口含烟用烟叶原料品质的一个有效途径。国内外的研究表明，通过微生物发酵能够大大缩短烟叶醇化的时间，明显消除烟叶的木质味，使烟叶的刺激性和异味减少，香气质和香气量变佳。发酵过程中，微生物进行代谢活动消耗掉烟叶中蛋白质，纤维素、淀粉及一些不良成分等，同时微生物通过代谢产生的一些物质又会给烟叶增添一些芳香气味，使烟叶各种成分比例趋于协调，从而提高烟叶的香气量、愉悦性等品质，使杂气、刺激性下降，具有更好的食用舒适性。

同时，微生物代谢过程中往往会产生功效性成分，如产生多种酶，有些酶本身对提高烟叶的香气有帮助，如蛋白酶可以水解烟叶中的蛋白质，水解产物和进一步转化的产物可以产生烟草致香物质；有些酶是对人体健康有益的酶，如淀粉酶对消化系统起着很重要的作用。因此接种合适的功能菌作用于烟叶中发酵不仅可从感官上增香提质，同时还可产生一些功能活性物质，这些酶的产生将大大提高口含烟食用价值。

人们希望找到其他新种类的微生物，以用于烟叶的发酵过程，并实现减害、增香和提高生物活性功能酶活性的效果。

发明内容

本发明第一方面涉及一种强化烟叶发酵过程的方法，使用解淀粉芽孢杆菌GZU03制剂对用于发酵过程的烟叶进行处理，所述解淀粉芽孢杆菌GZU03制剂的制备方法包括以下步骤：

(1)称取胰蛋白胨0.5-2g、酵母提取物0.5-1.5g、NaCl 6-8g、葡萄糖0.5-2g，补充蒸馏水至1000mL，并在110-130℃高压蒸汽灭菌10-30min，待冷却后接入所述解淀粉芽孢杆菌GZU03于30-40℃、170-190r/min进行培养18h±2h，得到种子液；

(2)将1000mL所述种子液于2-5℃、7000-9000r下离心10-20min，收集沉淀，并用6-9g/L的灭菌生理盐水洗涤所述沉淀，然后向所述沉淀中加入1000mL的灭菌生理盐水，摇匀，得到所述解淀粉芽孢杆菌GZU03制剂；

所述解淀粉芽孢杆菌GZU03已于2018年11月9日在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC M 2018762，保藏地址为中国武汉武汉大学湖北省武汉市武昌区珞珈山路16号。

优选地，所述灭菌生理盐水需在121℃高压蒸汽灭菌20min。