[发明专利]一种萝卜苗质外体抗冻蛋白的提取方法在审
| 申请号： | 201910069894.2 | 申请日： | 2019-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN111471082A | 公开（公告）日： | 2020-07-31 |
| 发明（设计）人： | 贾彩凤;袁志怡;余宗亮;郭乐宾;邹春静;常东民 | 申请（专利权）人： | 华东师范大学;上海奕农生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14 |
| 代理公司： | 上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙) 31257 | 代理人： | 董红曼 |
| 地址： | 200062 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 萝卜 苗质外体抗冻 蛋白 提取 方法 | ||
1.一种从冷诱导的萝卜苗中提取质外体抗冻蛋白的方法，其特征在于，所述方法为：将经培养的萝卜苗，在低温下进行冷诱导，然后切块，经水洗、真空渗透、离心，收集液体即为质外体抗冻蛋白；其中，所述真空渗透步骤中，将所述萝卜苗与提取缓冲液放入容器中，抽真空，进行真空渗透处理；所述提取缓冲液包括10-50mM的抗坏血酸、10～20mM的CaCl2，pH为3～5。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述萝卜苗是白萝卜苗、胡萝卜苗、水萝卜苗中的一种或几种。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述经培养的萝卜苗是在用于植物培养的自来水、蒸馏水和/或营养液中培养；其中，所述营养液为Hoagland’s营养液。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述低温下进行冷诱导，是指将所述经培养的萝卜苗在1～6℃下，冷诱导5～15天。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述真空渗透的条件为：压力为0.05～0.1Mpa，温度为4-20℃，时间为10～50min。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述萝卜苗与提取缓冲液的质量比为1：(10-30)。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述离心的条件为：4-10℃，转速10000-15000g，离心10～20分钟。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述质外体抗冻蛋白为分子量为14～66KD之间的蛋白质。
9.一种如权利要求1～8之任一项所述方法提取得到的质外体抗冻蛋白。
10.如权利要求9所述的质外体抗冻蛋白在食品、医药、化妆品中的应用。
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