[发明专利]一种重组痘苗病毒表面展示系统载体质粒及应用在审
| 申请号： | 201910069596.3 | 申请日： | 2019-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN109706177A | 公开（公告）日： | 2019-05-03 |
| 发明（设计）人： | 阎辉;罗砚曦;刘美丽 | 申请（专利权）人： | 浙江省医学科学院 |
| 主分类号： | C12N15/863 | 分类号： | C12N15/863;C12N7/01;C12R1/93 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 邱启旺 |
| 地址： | 310013 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组痘苗病毒 表面展示系统 表面展示 痘苗病毒 荧光蛋白 载体质粒 启动子 链霉亲和素磁珠 荧光标记示踪 大肠杆菌 流式细胞仪 组氨酸标签 病毒外膜 磁珠分选 单独使用 痘苗载体 多肽片段 抗性标志 抗性蛋白 快速筛选 药物抗性 展示系统 质粒构建 重组病毒 表达框 穿膜区 结合链 亲和素 分选 质粒 修饰 捕获 串联 应用 蛋白 | ||
1.一种重组痘苗病毒表面展示质粒表达载体，其特征在于，它的核苷酸序列如SEQ IDNo.22所示。包括依次连接的修饰的痘苗病毒H5启动子、大肠杆菌EM7启动子、串联的组氨酸标签、能结合链霉亲和素的多肽片段Nano-tag15、红荧光蛋白mCherry、Zeocin抗性蛋白、以及痘苗病毒D8蛋白穿膜区。所述修饰的痘苗病毒H5启动子的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，大肠杆菌EM7启动子的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，串联的组氨酸标签的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，能结合链霉亲和素的多肽片段Nano-tag15的核苷酸序列如SEQ IDNo.4所示，红荧光蛋白mCherry的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示，Zeocin抗性蛋白的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示，痘苗病毒D8蛋白穿膜区的核苷酸序列如SEQ ID No.7所示。
2.根据权利要求1所述的重组痘苗病毒表面展示质粒表达载体，其特征在于，还可以包括连接在痘苗病毒D8蛋白穿膜区后面的用于驱动目的基因表达的人工合成的痘苗病毒早-晚期启动子P-s/l及其下游的克隆位点。人工合成的痘苗病毒早-晚期启动子P-s/l的核苷酸序列如SEQ ID No.8所示。
3.根据权利要求1所述的重组痘苗病毒表面展示质粒表达载体，其特征在于，所述串联的组氨酸标签的氨基酸序列如SEQ ID No.9所示，能结合链霉亲和素的多肽片段Nano-tag15的氨基酸序列如SEQ ID No.10所示。红荧光蛋白mCherry的氨基酸序列如SEQ IDNo.11所示，Zeocin抗性蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.12所示，痘苗病毒D8蛋白穿膜区的氨基酸序列如SEQ ID No.13所示。
4.一种权利要求1所述重组痘苗病毒表面展示质粒表达载体在重组痘苗病毒构建和重组痘苗病毒分离中的应用。
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