[发明专利]杀灭金黄色葡萄球菌的嵌合酶抗生素及其制备和应用

权利要求书

1.一种杀灭金黄色葡萄球菌的嵌合酶抗生素，其特征在于，所述嵌合酶抗生素包括胞质转导肽CTP与金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶JDlys串联的重组蛋白CTP-JDlys。

2.根据权利要求1所述的杀灭金黄色葡萄球菌的嵌合酶抗生素，其特征在于，所述胞质转导肽CTP为Tat型CTP、Ant型CTP或TP10型CTP；所述重组蛋白CTP-JDlys为重组蛋白CTP_Tat-JDlys、CTP_Ant-JDlys或CTP_TP10-JDlys。

3.根据权利要求1或2所述的杀灭金黄色葡萄球菌的嵌合酶抗生素，其特征在于，所述胞质转导肽CTP为Tat型CTP；所述重组蛋白CTP-JDlys为重组蛋白CTP_Tat-JDlys。

4.一种根据权利要求1所述的杀灭金黄色葡萄球菌的嵌合酶抗生素的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、设计引物，分别以金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶JDlys基因和胞质转导肽CTP基因为模板，扩增JDlys基因片段和CTP基因片段；

S2、将扩增得到的JDlys基因构建重组质粒，将扩增得到的CTP基因插入至所述重组质粒中JDlys基因的5`端，构建含目标基因片段CTP-JDlys的重组质粒；

S3、将步骤S2所得的含目标基因片段CTP-JDlys的重组质粒经表达、纯化后，获得胞质转导肽CTP与金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶JDlys串联的的嵌合酶抗生素蛋白CTP-JDlys。

5.根据权利要求4所述的杀灭金黄色葡萄球菌的嵌合酶抗生素的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述裂解酶JDlys基因的上游引物JDlys-F的序列如SEQ ID NO.1所示，所述裂解酶JDlys基因的下游引物JDlys-R的序列如SEQ ID NO.2所示。

6.根据权利要求4所述的杀灭金黄色葡萄球菌的嵌合酶抗生素的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述转膜肽CTP基因为转膜肽CTP_TP10基因、转膜肽CTP_Ant基因或转膜肽CTP_TP10基因。

7.根据权利要求6所述的杀灭金黄色葡萄球菌的嵌合酶抗生素的制备方法，其特征在于，所述转膜肽CTP_Tat基因的上游引物CTP_Tat-F的序列如SEQ ID NO.3所示，所述转膜肽CTP_Tat基因的下游引物CTP_Tat-R的序列如SEQ ID NO.4所示；

所述转膜肽CTP_Ant基因的上游引物CTP_Ant-F的序列如SEQ ID NO.5所示，所述转膜肽CTP_Ant基因的下游引物CTP_Ant-R的序列如SEQ ID NO.6所示；

所述转膜肽CTP_TP10基因的上游引物CTP_TP10-F的序列如SEQ ID NO.7所示，所述转膜肽CTP_TP10基因的下游引物CTP_TP10-R的序列如SEQ ID NO.8所示。

8.根据权利要求4所述的杀灭金黄色葡萄球菌的嵌合酶抗生素的制备方法，其特征在于，步骤S3中，所述表达、纯化的步骤包括：采用原核表达系统pET-28a(+)，将融合基因片段CTP-JDlys构建重组质粒，将重组质粒转化至大肠杆菌BL21中，筛选阳性克隆进行蛋白的诱导表达和鉴定，纯化后获得重组蛋白CTP-JDlys。

9.一种基于权利要求1所述的嵌合酶抗生素在金黄色葡萄球菌感染角质细胞模型和金黄色葡萄球菌感染小鼠表皮脓肿模型中的应用；所述金黄色葡萄球菌为MRSA菌株USA300。

10.一种根据权利要求1所述的嵌合酶抗生素在制备耐药金黄色葡萄球菌裂菌制剂中的用途。