[发明专利]香樟的愈伤组织培养方法

说明书

本发明公开了一种香樟的愈伤组织培养方法，按照下述步骤进行：将香樟叶柄和茎部冲洗干净，得到基础材料，将所述基础材料用乙醇水溶液浸泡10～15秒后取出，用次氯酸钠水溶液浸泡10～15分钟并同时搅拌，得到脱毒材料；用无菌水冲洗所得脱毒材料3～5次，吸干脱毒材料表面的无菌水，将该脱毒材料剪切成块状后放到灭菌后的诱导培养基中，于20～25℃培养7～14天，得到愈伤组织；本发明首创利用植物生长调节剂诱导香樟叶柄与茎段产生愈伤组织，便于为研究香樟香气来源等其它机构机理提供原料；比起传统的种子繁殖和扦插、嫁接繁殖，利用本方法培养香樟的愈伤组织具有操作简便易行，条件易于控制，周期短的优点。

技术领域

本发明属于成体植株离体培养技术领域，具体涉及一种香樟的愈伤组织培养方法。

背景技术

香樟是我国的珍贵树种，优点众多，其木材坚硬，纹理雅致，可用于制作家具。整棵植株都具有独特的香氛，有驱虫等功效，是提取纯天然香料重要的材料。香樟枝叶茂 密，树形优美，是一种优良的城市绿化和园林景观用树种。

但香樟生长不耐寒冷，在北方推广困难，且采用种子繁殖的方式发芽缓慢，繁殖周期较长，苗木参差不齐，采用扦插、嫁接等无性繁殖方式也比较困难，而香樟母株材料 来源也有限。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种香樟的愈伤组织培养方法，该愈 伤组织培养方法利用植物组织培养诱导获得香樟的愈伤组织，便于对其进行繁殖或进行 其他相关研究，进而发掘其更多的利用价值，得到更高的经济效益。

为此，本发明的技术方案如下：

一种香樟的愈伤组织培养方法，按照下述步骤进行：

步骤1，将香樟叶柄和茎部冲洗干净，得到基础材料，将所述基础材料用体积浓度为 80～85％的乙醇水溶液浸泡10～15秒后取出，用15～20wt％的次氯酸钠水溶液浸泡10～15分 钟并同时搅拌，得到脱毒材料；

步骤2，用无菌水冲洗步骤1所得脱毒材料3～5次，吸干脱毒材料表面的无菌水，将该脱毒材料剪切成块状后放到灭菌后的诱导培养基中，于20～25℃培养7～14天(每天24小时)，得到愈伤组织；

其中，所述诱导培养基的配制方法如下：

将MS培养基与6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)均匀混合，调整pH至 6.9～7.1，再加入琼脂，其中，所述MS培养基的体积份数、6-苄氨基腺嘌呤的质量份数、 萘乙酸的质量份数和琼脂的质量份数的比为1000：(1～1.5)：0.2：(6300～6500)；

在上述技术方案中，当所述体积份数的单位为mL时，所述质量份数的单位为mg。

在所述步骤2中，光照周期16小时/天。

在所述步骤2中，所述MS培养基的配制方法如下：

将大量母液、微量母液、铁盐母液、有机母液和蔗糖均匀混合，再用去离子水定容，以使1000体积份数的所述MS培养基中，所述大量母液的体积份数为100，所述微量母 液的体积份数为10，所述铁盐母液的体积份数为10，所述有机母液的体积份数为5，所 述蔗糖的质量份数为14500～15500；

所述大量母液的组成如下：

所述微量母液的组成如下：

所述铁盐母液的组成如下：

Na₂-EDTA _{1.853～1.859g/L}

FeSO₄·7H₂O 1.387～1.393g/L