[发明专利]一种香豆素类化合物及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种香豆素类化合物及其制备方法和用途，化合物的结构式如式I，为其中，R₁选自氢、羟基、烷氧基，R₂选自羟基、烷氧基。将浆果乌桕经95％乙醇粗提，通过正相硅胶色谱、薄层色谱(TLC)、反相中压液相色谱(RP‑MPLC)、Toyopearl HW40、Sephadex LH‑20以及高效液相色谱(HPLC)等技术分离纯化而得。本发明中提供的化合物1和5(2μM)能抑制肝癌细胞HepG2中HuR的表达，且化合物1抑制效果强于化合物5，说明该化合物对肝癌细胞中HuR蛋白的表达有显著抑制作用，具有很好的潜力继续下一步的临床前研究。此外该类化合物也具有显著地抗炎活性。

技术领域

本发明涉及植物化学及医药技术领域，具体涉及一种香豆素类化合物及其制备方法和在制备HuR抑制剂、抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

这里的陈述仅提供与本发明有关的背景信息，而不必然构成现有技术。

浆果乌桕(Sapium baccatum)属于大戟科乌桕属，是一种高大的乔木，主要分布在中国(仅在云南和西藏发现)和东南亚、南亚等热带和亚热带地区国家。国内的多种中药复方制剂中都包含有浆果乌桕，功能主治：调补四塔，调经活血，补土健胃，行气止痛，其复方制剂用于治疗肩周炎、痛风、中风偏瘫、脑梗塞、糖尿病等。近代药理研究表明，浆果乌桕具有多种药理作用，包括有抗炎、抗菌、降压等作用。浆果乌桕的化学成分主要包括有五环三萜类、鞣质类、黄酮苷类、生物碱和甾体类等。

人类抗原R蛋白(human antigen R，HuR)即ELAV1是胚胎致死性异常视觉蛋白(thehuman embryonic lethal abnormal vision，ELAV)家族成员之一，广泛表达于小肠、脾脏、卵巢等各种组织中，通过转录后机制参与细胞中许多分子的调控表达，而该家族中其他的Hu蛋白几乎只表达于神经组织中。研究表明，HuR是一种RNA结合蛋白，在多种肿瘤细胞中过度表达。HuR的表达影响着肿瘤细胞内与促进肿瘤细胞生长有关的生物分子的表达，与肿瘤的发生发展、血管新生、侵袭、转移、耐药、预后不良等相关因素密切相关。近年来，HuR的研究取得了诸多的进展，它可能是癌症治疗重要的分子靶点，抑制HuR可能抑制肿瘤生长，增强药物的抗癌活性。因此开发HuR小分子抑制剂作为抗癌药物具有十分重要的意义。据本发明的发明人所知，目前对浆果乌桕化学成分及药理活性的相关报道较少，没有关于浆果乌桕的化学成分在抗肿瘤药物中应用的相关报道。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明的目的是提供一种香豆素类化合物及其制备方法和用途。

为了实现上述目的，本发明的技术方案为:

一方面，一种式I所示香豆素类化合物，其化学结构式为:

其中，R₁选自氢、羟基、烷氧基，R₂选自羟基、烷氧基。

为了获得上述化合物，本发明另一方面，一种上述化合物的制备方法，将浆果乌桕树皮采用94～96％乙醇回流提取，趁热过滤得提取液，将提取液减压浓缩获得94～96％乙醇提取物浸膏；向94～96％乙醇提取物浸膏中加入甲醇混悬，采用石油醚进行脱脂萃取，萃取后的甲醇部分减压浓缩获得甲醇浸膏；甲醇浸膏加入水混悬，采用乙酸乙酯进行萃取，萃取后获得的乙酸乙酯部分减压浓缩，得乙酸乙酯萃取物；取部分乙酸乙酯萃取物上样于正向硅胶柱色谱，所述硅胶柱色谱采用石油醚与乙酸乙酯混合溶液和/或乙酸乙酯与甲醇混合溶液作为洗脱剂，经硅胶柱色谱分离为多个组分，选取硅胶柱层析分离后的组分再经过反相中压液相色谱(RP-MPLC)分离获得不同组分，选取不同组分通过其它色谱法分离纯化获得式I所示化合物，所述其他色谱法为薄层色谱法(TLC)、Sephadex LH-20柱色谱法、Toyopearl HW40柱色谱法、反相中压液相色谱(RP-MPLC)法、高效液相色谱(HPLC)法中的一种或几种。