[发明专利]一种二萜类化合物、其制备方法及其用途在审

专利信息
申请号: 201910034131.4 申请日: 2019-01-15
公开(公告)号: CN109651154A 公开(公告)日: 2019-04-19
发明(设计)人: 符格意;王继栋;张辉;王瑞俊;齐欢;吴敏;滕云;郑玲辉 申请(专利权)人: 浙江海正药业股份有限公司;浙江大学
主分类号: C07C69/757 分类号: C07C69/757;C12P7/62;A61P35/00;A61P35/02;A61K31/215;C12R1/29
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 318000 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 萜类化合物 制备方法和应用 二萜类化合物 抗肿瘤活性 天然化合物 发酵培养 提取分离 小单孢菌 制备
【权利要求书】:

1.一种二萜类化合物,其特征在于,其化学结构式如式(I)所示:

2.一种制备如权利要求1所述的二萜类化合物的方法,所述方法包括如下步骤:

(1)在包含碳源和氮源的培养基中发酵培养小单孢菌(Micromonospora sp.HM134,其保藏编号为CGMCC No.15401),并收集发酵液;

(2)将步骤(1)收集得到的发酵液,分离得到菌丝体和上清液,菌丝体经过有机溶剂A提取得到提取液;上清液经树脂吸附,然后用有机溶剂B洗脱得到洗脱液;合并提取液和洗脱液,得合并液;

(3)将步骤(2)所得合并液,依次经过浓缩、萃取、浓缩、硅胶柱层析、凝胶柱层析后得到含有二萜类化合物的流分样品;

(4)将步骤(3)中得到的流分样品进行反相柱层析得到二萜类化合物。

3.如权利要求2所述的方法,其中步骤(1)所述的碳源选自葡萄糖、可溶性淀粉、糊精、玉米淀粉、工业糖蜜、甘油、蔗糖、山梨醇、甘露醇、乳糖、麦芽糖、木聚糖或它们的组合,优选为可溶性淀粉与葡萄糖组合;所述的氮源选自酵母粉、酵母抽提物、黄豆饼粉、大豆粉、花生饼粉、棉籽饼粉、麦芽抽提物、蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏、玉米浆干粉、麸皮、麸质粉、尿素、铵盐或它们的组合,优选为黄豆饼粉、酵母抽提物、麦芽抽提物或它们的组合。

4.如权利要求2所述的方法,其中步骤(2)中所述树脂为大孔吸附树脂,优选为HP-20大孔吸附树脂,所述有机溶剂A选自低级酮、C1-C3醇或它们的混合物,优选自丙酮、甲醇、乙醇或者它们中的两种或多种的组合;所述有机溶剂B选自低级酮、C1-C3醇或它们的混合物,优选自丙酮、甲醇、乙醇或者它们中的两种或多种的组合。

5.如权利要求2所述的方法,其中步骤(3)中所述的硅胶柱层析所使用的硅胶粒径选自100-200目,所述硅胶柱层析所使用的洗脱溶剂为C5-C8烷烃和脂肪酸酯的混合溶剂系统,所述硅胶柱层析所使用的洗脱方式优选为梯度洗脱;进一步地,所述C5-C8烷烃优选自正庚烷、正己烷或它们的混合物,所述脂肪酸酯优选为乙酸乙酯。

6.如权利要求2所述的方法,其中步骤(3)中所述硅胶柱层析所使用的洗脱方式为正庚烷:乙酸乙酯=100:0-80:20(V/V)梯度洗脱;或为正己烷:乙酸乙酯=100:0-80:20(V/V)梯度洗脱。

7.如权利要求2所述的方法,其中步骤(3)中所述的凝胶柱层析所使用的凝胶为凝胶LH-20,所述凝胶柱层析所使用的洗脱溶剂为氯代烷烃和C1-C3醇的混合溶剂系统,所述凝胶柱层析所使用的洗脱方式优选为等度洗脱;所述氯代烷烃优选自氯仿、二氯甲烷或它们的混合物,所述C1-C3醇优选自甲醇、乙醇或它们的混合物。

8.如权利要求2所述的方法,其中步骤(3)中所述凝胶柱层析所使用的洗脱溶剂为氯仿:甲醇系统(90:10-10:90,V/V)或二氯甲烷:甲醇系统(90:10-10:90,V/V);优选为氯仿:甲醇=50:50(V/V)或者二氯甲烷:甲醇=50:50(V/V)。

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