[发明专利]一种黄曲霉毒素B1降解酶及其应用和检测黄曲霉毒素B1的免疫层析试纸条

说明书

本发明涉及免疫检测技术领域，公开了一种黄曲霉毒素B1降解酶及其应用和检测黄曲霉毒素B1的免疫层析试纸条。本发明所述黄曲霉毒素B1降解酶具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。本发明利用所述黄曲霉毒素B1降解酶特异性结合黄曲霉毒素B1的特性制作胶体金免疫层析试纸条，与黄曲霉毒素B1具有更高的亲和力，灵敏度高；具有更强的特异性，与其他毒素无交叉；且受体可以体外原核表达，与抗体相比较具有产量高，周期短，成本低的优势，且整个过程可控；免疫层析试纸条检测黄曲霉毒素B1时无需任何其他试剂，加入处理后的样品液后，5‑10min即可获得结果，大大提高效率，可实现黄曲霉毒素B1的现场快速检测。

技术领域

本发明涉及免疫检测技术领域，具体涉及一种黄曲霉毒素B1降解酶及其应用和检测黄曲霉毒素B1的免疫层析试纸条。

背景技术

据调查发现，全球40％以上的粮食作物在储存和运输过程中受霉菌的影响，且霉菌在代谢过程中产生毒素。联合国粮农组织估算全球谷物25％受霉菌毒素污染，且至少2％农作物受黄曲霉毒素污染而报废。黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉产生的有毒代谢产物，在已知近百种毒素中，黄曲霉毒素是污染频率最高，毒性最强的次生真菌毒素，1993年，世界卫生组织把黄曲霉毒素列为I类致癌物。

目前已经发现有20余种黄曲霉毒素，在受污染的农副产品中，黄曲霉毒素B1是最常见，最具代表性的一种毒素，且致癌性极强、毒性极大，给人民群众的身体健康和消费安全带来极大的危害。黄曲霉毒素广泛存在于农副产品、动植物及土壤中，尤其在谷物、花生、坚果和动物饲料中经常发现。因此，对黄曲霉毒素B1进行快速有效的检测关乎人民群众的身体健康和食品安全。

目前对黄曲霉毒素B1检测方法主要有酶联免疫吸附法、免疫亲和柱和荧光分光光度法及高效液相色谱法相结合、高效液相色谱和串联质谱法相结合等，虽然这些方法检测数据准确，分辨率高等，但是它们操作步骤繁琐，耗时较长，对实验人员技术要求高，且仪器价格昂贵，不适合现场快速检测，因此急需开发快速高效、特异准备、操作简便的黄曲霉毒素检测方法。

胶体金免疫层析法是近年来出现的一种操作简单快速、成本低廉，便于现场操作的检测方法。胶体金免疫层析法利用抗原抗体特异性识别进行检测，但是抗体制作成本高，周期长，批间差异大，不利于产品的制作。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种黄曲霉毒素B1降解酶，使其能够特异性结合黄曲霉毒素B1，并可应用于黄曲霉毒素B1的免疫检测中；

本发明的另外一个目的在于提供一种基于上述黄曲霉毒素B1降解酶的检测黄曲霉毒素B1的免疫层析试纸条，使得所述试纸条能够检测黄曲霉毒素B1，并具备较高的特异性和灵敏度，检测效率高，制备工艺简单。

为了实现上述发明目的，本发明提供了如下技术方案：

一种黄曲霉毒素B1降解酶，具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。

本发明所提供的黄曲霉毒素B1降解酶可以与黄曲霉毒素特异结合，基于这种特性采用类似Elisa方法中的竞争法原理，让黄曲霉毒素B1-胶体金标记物和待测样品中的黄曲霉毒素B1竞争结合所述黄曲霉毒素B1降解酶，以此实现检测黄曲霉毒素B1的目的。

基于此，本发明提供了所述黄曲霉毒素B1降解酶在检测黄曲霉毒素B1和/或制备检测黄曲霉毒素B1的免疫检测产品中的应用。

在本发明具体实施方式中，所述免疫检测产品为免疫层析试纸条，更具体地为免疫层析胶体金试纸条。

依据上述应用，本发明提供了一种检测黄曲霉毒素B1的免疫层析试纸条，包括黄曲霉毒素B1降解酶-胶体金标记物、IgG-胶体金标记物和试纸条；所述试纸条上的检测线包被有黄曲霉毒素B1，所述质控线包被有抗IgG抗体；所述黄曲霉毒素B1降解酶具有如SEQ IDNO:1所示的氨基酸序列。