[发明专利]二羰基还原酶及其在他汀类药物中间体合成中的应用

权利要求书

1.一种二羰基还原酶，其特征在于，为氨基酸序列为SEQ ID NO：1所示的蛋白质。

2.根据权利要求1所述的二羰基还原酶，其特征在于，所述二羰基还原酶的编码基因是序列表中SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列。

3.含有权利要求1或2所述的二羰基还原酶编码基因的重组表达载体、转基因细胞系或宿主菌。

4.权利要求1所述的二羰基还原酶在瑞舒伐他汀、阿托伐他汀中间体合成中的应用。

5.根据权利要求4所述的二羰基还原酶在瑞舒伐他汀、阿托伐他汀中间体合成中的应用，其特征在于，包括以下步骤：式II化合物在二羰基还原酶的作用下反应生成式I化合物，反应式如下：

其中，R₁选自乙酰氧基、腈基、卤素、芳香基、烷基；R₂选自烷基、环烷基。

6.根据权利要求5所述的二羰基还原酶在瑞舒伐他汀、阿托伐他汀中间体合成中的应用，其特征在于，R₁选自腈基或乙酰氧基；R₂选自乙基或叔丁基，方案选自如下反应：

反应1：

；

反应2：

；

反应3：

；

反应4：

。

7.根据权利要求6所述的二羰基还原酶在瑞舒伐他汀、阿托伐他汀中间体合成中的应用，其特征在于，所述二羰基还原酶为基因工程菌全细胞、破碎酶液、冻干粉或固定化酶或固定化细胞，反应过程中，需添加辅酶，所述辅酶为NADP+或NADPH。

8.根据权利要求6所述的二羰基还原酶在瑞舒伐他汀、阿托伐他汀中间体合成中的应用，其特征在于，反应在缓冲溶液中进行，所述缓冲溶液选自磷酸盐缓冲溶液、碳酸盐缓冲溶液、Tri-HCl缓冲溶液、柠檬酸盐缓冲溶液或MOPS缓冲溶液中的一种或多种。

9.根据权利要求7所述的二羰基还原酶在瑞舒伐他汀、阿托伐他汀中间体合成中的应用，其特征在于，所述的二羰基还原酶为基因工程菌全细胞，其投入量控制为50-110g/L，反应转化温度控制为25-37℃，pH控制为6-9。

10.根据权利要求7所述的二羰基还原酶在瑞舒伐他汀、阿托伐他汀中间体合成中的应用，其特征在于，所述反应在助溶剂存在的条件下进行，所述助溶剂选自DMSO、乙酸乙酯、乙酸丁酯、异丙醇、DMF、TBME、二氯甲烷、乙酸乙烯酯中的一种或几种。