[发明专利]一种光调控的用于核酸提取的功能化毛细管及其制备方法与应用

说明书

本发明公开一种光调控的用于核酸提取的功能化毛细管及其制备方法与应用，属于生物检测技术领域。本发明通过化学修饰的方法，在毛细管内表面依次修饰3‑氨丙基三乙氧基硅烷、4‑溴甲基‑3‑硝基苯甲酸、4‑氨基‑1‑丁醇，使得毛细管内表面带有大量正电荷，从而可以吸附带有负电性的核酸；并且，在302nm紫外光的照射下，4‑溴甲基‑3‑硝基苯甲酸与4‑氨基‑1‑丁醇反应生成的化学键发生断裂，从而使吸附于毛细管内表面的核酸重新释放至液相中，用于下一步的检测。本发明极大程度地简化了核酸分离与提取的操作过程，缩短了核酸分离与提取的时间，可利用紫外光照射使提取得到的核酸分子重新释放进入液相中，用于后续的储存或检测。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，特别涉及一种光调控的用于核酸提取的功能化毛细管及其制备方法与应用。

背景技术

核酸扩增检测具有灵敏度高、特异性强等特点，被认为是可用于疾病早期诊断中的强有力的武器。核酸提取是核酸扩增检测过程中的首要核心步骤。其主要目的是从复杂的实际样品中提取出纯度较高的待检测核酸样品，消除蛋白质、多糖、脂肪等生物大分子，避免其对下游核酸扩增及检测的影响，从而最大程度上保证核酸分析的准确性。

目前商业化的核酸提取方法主要包括离心柱法和磁分离法。该类方法需要复杂的人工操作以及专业的试验设备，并且存在着耗时长等弊端，极大程度上限制了其在临床上的推广与应用。因此，亟需开发一种操作简单的、快速的核酸分离与提取装置。

发明内容

为了克服现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种光调控的用于核酸提取的功能化毛细管。通过化学修饰的方法，在毛细管内表面依次修饰3-氨丙基三乙氧基硅烷((3-aminopropyl)triethoxysilane，APTES)、4-溴甲基-3-硝基苯甲酸(4-bromomethyl-3-nitrobenzoic acid)、4-氨基-1-丁醇(4-Amino-1-butanol)，使得毛细管内表面带有大量正电荷，从而可以吸附带有负电性的核酸，达到简单、快速的进行核酸分离与提取的目的。并且，在302nm紫外光的照射下，4-溴甲基-3-硝基苯甲酸与4-氨基-1-丁醇反应生成的化学键可发生断裂，从而使吸附于毛细管内表面的DNA重新释放至液相中，用于下一步的检测。

本发明的另一目的在于提供上述光调控的用于核酸提取的功能化毛细管的制备方法。

本发明的另一目的在于提供上述光调控的用于核酸提取的功能化毛细管的的应用。

本发明的再一目的在于提供一种含有光调控的用于核酸提取的功能化毛细管的试剂盒。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种光调控的用于核酸提取的功能化毛细管，通过化学修饰的方法，在毛细管内表面依次修饰3-氨丙基三乙氧基硅烷((3-aminopropyl)triethoxysilane，APTES)、4-溴甲基-3-硝基苯甲酸(4-bromomethyl-3-nitrobenzoic acid)、4-氨基-1-丁醇(4-Amino-1-butanol)，使得毛细管内表面带有大量正电荷，从而可以吸附带有负电性的核酸；并且，在302nm紫外光的照射下，4-溴甲基-3-硝基苯甲酸与4-氨基-1-丁醇反应生成的化学键可发生断裂，从而使吸附于毛细管内表面的核酸重新释放至液相中，用于下一步的检测。化学标记原理如图1所示。

所述的光调控的用于核酸提取的功能化毛细管的制备方法，包括以下步骤：

(1)用盐酸清洗毛细管内部；

(2)用去离子水清洗毛细管内部；

(3)用NaOH溶液清洗毛细管内部；

(4)用去离子水清洗毛细管内部；

(5)将清洗后的毛细管置于干燥箱内干燥；