[发明专利]在发酵方法中释放重组蛋白的细菌菌株

权利要求书

1.一种含有在功能性启动子的控制下编码重组蛋白的开放阅读框的细菌菌株，其特征在于

所述细菌菌株含有在功能性启动子控制下编码突变肽聚糖相关的脂蛋白(Pal蛋白)的开放阅读框，所述突变Pal蛋白已经突变，使得其不具有用于所述细菌的外细胞膜的膜锚。

2.根据权利要求1所述的细菌菌株，其特征在于所述细菌菌株是革兰氏阴性细菌。

3.根据权利要求1或2中任一项或多项所述的细菌菌株，其特征在于所述细菌菌株是大肠杆菌(Escherichia coli)种的菌株。

4.根据权利要求1至3中任一项或多项所述的细菌菌株，其特征在于编码所述突变Pal蛋白的所述开放阅读框已经突变，使得所述开放阅读框编码在氨基酸位置1至6中一个或多个处的已经突变的突变Pal蛋白。

5.根据权利要求4所述的细菌菌株，其特征在于编码所述突变Pal蛋白的所述开放阅读框已经突变，使得所述开放阅读框编码N-末端半胱氨酸残基已被取代的突变Pal蛋白。

6.根据权利要求4所述的细菌菌株，其特征在于编码所述突变Pal蛋白的所述开放阅读框已经突变，使所述开放阅读框编码不包含N-末端半胱氨酸残基的突变Pal蛋白。

7.根据权利要求4所述的细菌菌株，其特征在于编码所述突变Pal蛋白的所述开放阅读框已经突变，使得所述开放阅读框编码不存在氨基酸1至6的突变Pal蛋白。

8.根据权利要求1至7中任一项或多项所述的细菌菌株，其特征在于所述重组蛋白是异源蛋白。

9.一种质粒，包含

-在功能性启动子的控制下编码重组蛋白的开放阅读框，

其特征在于

-含有在功能性启动子的控制下编码信号肽和突变Pal蛋白的开放阅读框，所述Pal蛋白已经突变使得其不具有用于所述细菌的外细胞膜的膜锚。

10.一种用于发酵生产重组蛋白的方法，其特征在于在发酵培养基中培养权利要求1至8中任一项所述的细菌菌株，发酵后从细胞中去除所述发酵培养基，并从所述发酵培养基中分离出重组蛋白。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于在去除所述发酵培养基之后，从所述发酵培养基中纯化所述重组蛋白。

12.根据权利要求10和11中任一项或多项所述的方法，其特征在于诱导所述突变Pal蛋白的表达。

13.根据权利要求10至12中任一项或多项所述的方法，其特征在于在诱导所述重组蛋白的表达后，诱导所述突变Pal蛋白的表达。