[发明专利]阻断EMT途径并克服癌干细胞的IL8

说明书

提出了靶向肿瘤表达的或内源性的IL‑8的重组重组IL‑8抗体、其片段或对IL‑8具有高亲和力的单链可变片段(scFv)的组合物、方法和用途。优选地，该重组IL‑8抗体或scFv片段包括包含选自SEQ ID NO.1‑15、31‑32的第一氨基酸序列的VH区段，和/或包含选自SEQ ID NO.16‑30、33‑34的第二氨基酸序列的VL区段。该重组IL‑8抗体或scFv片段可被配制成药物组合物，以施用于患有肿瘤的患者以减少该肿瘤的转移、减少肿瘤微环境中的免疫抑制或减少Th2介导的免疫反应。

本申请要求2017年11月1日提交的序列号为62/580,232的我们共同未决的美国临时专利申请的优先权。

技术领域

本发明的领域是用于治疗患有肿瘤的患者以减少肿瘤转移或减少肿瘤微环境中的免疫抑制的重组scFv或抗白细胞介素8(IL-8)抗体的组合物、方法和用途。

背景技术

背景描述包括可用于理解本发明的信息。并不承认本文提供的任何信息是现有技术或与当前要求保护的发明相关，也不承认具体地或隐含地引用的任何出版物是现有技术。

本文中的所有出版物和专利申请都通过引用并入，其程度如同每个单独的出版物或专利申请被具体地且单独地指明通过引用并入一样。在并入的参考文献中的术语的定义或用法与本文提供的该术语的定义不一致或相反的情况下，适用本文提供的该术语的定义，而不适用该术语在该参考文献中的定义。

白细胞介素-8(IL-8)，也称为中性粒细胞趋化因子，主要由巨噬细胞和上皮细胞产生，并且已知通过将免疫细胞(例如，中性粒细胞)募集到感染部位而在免疫系统中起关键作用。近来，对鉴定肿瘤产生的IL-8与肿瘤发展之间的关系的兴趣日益增长，特别是在肿瘤转移和肿瘤微环境中免疫抑制的机制方面。例如，几项研究发现，肿瘤产生的IL-8在转移性肿瘤细胞中高表达，并且确实能够诱导肿瘤细胞的上皮-间质转化，从而产生肿瘤起始细胞(例如，肿瘤干细胞)。其他研究显示，肿瘤产生的IL-8吸引髓源性抑制细胞(MDSC)，这些髓源性抑制细胞可通过干扰肿瘤微环境中T细胞介导的免疫反应而在肿瘤周围提供免疫抑制性微环境。

为了减轻IL-8在肿瘤发展中的作用，已经努力通过提供针对IL-8的人抗体或人源化抗体、针对IL-8的反义寡核苷酸或微RNA来中和肿瘤表达的或内源性的IL-8。例如，授予Bar-Eli的美国专利公开号2003/0068319披露了通过完全人源化和分离的单克隆或多克隆IL-8来抑制血管生成和肿瘤转移。在另一个实例中，授予Petrzkowski的美国专利号5,849,903传授了针对IL-8的有效减缓黑素瘤或肺癌生长的20个碱基对长度的反义寡核苷酸。然而，反义寡核苷酸或微RNA的作用可以根据肿瘤类型以及此类组合物的递送方法而改变。而且，分离的人或人源化抗体在一些肿瘤微环境中可能无效，在这些肿瘤微环境中分离的人或人源化抗体被肿瘤微环境中的内源金属蛋白酶裂解。

因此，虽然已经研究了几种抑制肿瘤微环境中的IL-8表达或活性的方法，但使用重组IL-8抗体或具有对IL-8有高亲和力的氨基酸序列的单链可变片段(scFv)靶向IL-8在很大程度上尚未被研究。因此，仍然需要靶向肿瘤微环境中肿瘤表达的或内源性的IL-8以促进癌症治疗效果的重组IL-8抗体或单链可变片段(scFv)的改良组合物、方法和用途。

发明内容

本发明的主题涉及靶向肿瘤表达的或内源性的IL-8并中和IL-8在促进肿瘤细胞EMT(上皮-间质转化)和/或肿瘤微环境中的免疫抑制方面的作用的重组IL-8抗体、单链可变片段(scFv)或对IL-8具有亲和力的其他抗体部分(包括融合产物，特别是在TxM中)的多种组合物、方法和用途。

因此，该主题的一个方面包括单链可变片段(scFv)肽。scFv肽包括包含第一氨基酸序列的V_H区段和/或包含第二氨基酸序列的V_L区段。第一氨基酸序列和第二氨基酸序列分别选自SEQ ID NO.1-15、31-32或SEQ ID NO.16-30、33-34。