[发明专利]非酒精性脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝炎和/或肝纤维化的非侵入性诊断

说明书

本发明涉及一种基于体液样品中miR‑452的水平来诊断非酒精性脂肪性肝病、特别是非酒精性脂肪性肝炎和/或肝纤维化的非侵入性方法。

技术领域

本发明涉及用于诊断非酒精性脂肪性肝病，特别是非酒精性脂肪性肝炎和/或肝纤维化的新的非侵入性方法。

背景技术

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种无声疾病，其被定义为由过量饮酒之外的原因造成的肝脏中的脂肪积累(脂肪变性)。NAFLD是转介给肝病学家的患者中转氨酶升高的最常见原因。NAFLD的范围从良性的单纯脂肪变性到对某些患者而言的病态病症非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，其中坏死/炎性过程促使纤维化在肝脏中的逐渐累积，最终导致肝硬化、肝功能衰竭、肝细胞癌(HCC)、肝移植和肝死亡。从流行病学和病理生理学两种观点来看，NAFLD和NASH与肥胖症、代谢综合征和2型糖尿病密切相关。因此，在过去的几十年中，在肥胖症和2型糖尿病流行的同时，NAFLD和NASH的盛行率急剧提高，并且NASH变成美国肝脏移植的首要原因。因此，NASH被认为是全球范围内日益严重的公共健康问题，因为已知目前尚无用于NASH的最佳诊断解决方案并且尚无批准的治疗方法。

尽管可以通过使用超声技术检测肝脏中脂肪堆积的存在来诊断NAFLD，但NASH和与NASH相关的肝纤维化只能通过对肝组织活检的组织学检查来诊断。在对肝组织活检进行显微镜检查时，NASH被定义为脂肪酸积累(脂类小滴)并伴有肝细胞损伤(肝细胞的膨胀或坏死)和小叶炎症的迹象。尽管纤维化并不是诊断NASH的必需组织学特点，但肝纤维化的存在和分期对于评估疾病的严重性以及演变为肝硬化、HCC(肝细胞癌)和肝死亡(其是与肝脏相关的患者死亡)的风险来说是至关重要的。

已经开发了组织学评分/分期系统，用于评估NAFLD活性水平和纤维化分期并估算演变为临床肝结果的风险。已开发了NALFD活性评分(NAS)用于评估所述疾病的活性。所述NAS是对脂肪变性(0到3)、小叶炎症(0到3)、肝细胞膨胀(0到2)的未加权的组织活检样品的个体评分的总和。根据Kleiner等(Hepatology,2005；41:1313-21)，NAS是从肝组织活检切片做出的三种组织学评分的总和：

-S：脂肪变性评分：0：5％；1：5-33％；2：34-66％和3：66％

-LI：小叶炎症评分(每个20x视野的病灶)：0：无；1：2；2：2-4和3：4

HB：膨胀变性评分：0：无；1：少量；2：许多细胞/显著膨胀。

使用这种评分系统，NASH患者具有NAS≥3，并在脂肪变性中具有至少1分，在小叶炎症中具有至少1分，且在肝细胞膨胀中具有至少1分。当NAS≥4，并在脂肪变性中具有至少1分，在炎症中具有至少1分且在肝细胞膨胀中具有至少1分时，患者被认为具有活跃的NASH。

组织学检查中纤维化的定位和程度标志着疾病的严重性(进展)，并且NASH-CRN已开发了一种专用的纤维化分期系统(Kleiner等，Hepatology,2005；41:1313-21)：

使用这种纤维化分期系统，没有或具有极少纤维化(F＝0-1)的患者通常不被认为处于肝硬化、HCC或肝死亡的风险下。具有显著(F＝2)和中度纤维化(F＝3)的患者处于发生肝硬化、肝功能衰竭、HCC和肝死亡的提高的风险下。具有代偿性肝硬化的患者具有重度纤维化(F＝4)，并处于肝功能衰竭(失代偿性肝硬化)、HCC和与肝脏相关的死亡的高风险下。

源自于这两种被广泛接受的评分和分期系统，最近对活性指数(AI)给予了特别关注，其可以被定义为小叶炎症评分和肝细胞膨胀评分的总和。此外，Munteanu等，AlimentPharmacolTher.,2016,44(8):877-89提出了SAF特征，以分开地报告脂肪变性、疾病活性和纤维化的评分。