[发明专利]修饰型脂肪酶及其用途

权利要求书

1.一种修饰型脂肪酶，具有在序列号1的氨基酸序列中含有选自T130C-S153C、A249P、F259Y、S282P、S283Y和S300P中的一个或两个以上的氨基酸取代的氨基酸序列或与该氨基酸序列显示90％以上同源性的氨基酸序列，所述修饰型脂肪酶与由序列号1的氨基酸序列构成的脂肪酶相比，高温下的反应性和/或稳定性提高。

2.根据权利要求1所述的修饰型脂肪酶，其中，修饰型脂肪酶的氨基酸序列中含有的氨基酸取代为T130C-S153C或S283Y，高温下的反应性提高。

3.根据权利要求1所述的修饰型脂肪酶，其中，修饰型脂肪酶的氨基酸序列中含有的氨基酸取代为A249P、S283Y或S300P，高温下的稳定性提高。

4.一种脂肪酶，是序列号2～7中任一个氨基酸序列或与该氨基酸序列显示90％以上同源性的氨基酸序列，所述脂肪酶与由序列号1的氨基酸序列构成的脂肪酶相比高温下的反应性和/或稳定性提高，其中，同源性的基准为序列号2的氨基酸序列的情况下在130位半胱氨酸和153位半胱氨酸以外的位置产生氨基酸序列的不同，同源性的基准为序列号3的氨基酸序列的情况下在249位脯氨酸以外的位置产生氨基酸序列的不同，同源性的基准为序列号4的氨基酸序列的情况下在259位酪氨酸以外的位置产生氨基酸序列的不同，同源性的基准为序列号5的氨基酸序列的情况下在282位脯氨酸以外的位置产生氨基酸序列的不同，同源性的基准为序列号6的氨基酸序列的情况下在283位酪氨酸以外的位置产生氨基酸序列的不同，同源性的基准为序列号7的氨基酸序列的情况下在300位脯氨酸以外的位置产生氨基酸序列的不同。

5.一种基因，编码权利要求1～4中任一项所述的修饰型脂肪酶。

6.根据权利要求5所述的基因，其中，含有序列号8～19中任一个碱基序列。

7.一种重组DNA，含有权利要求5或6所述的基因。

8.一种微生物，保有权利要求7所述的重组DNA。

9.根据权利要求8所述的微生物，其中，宿主是大肠杆菌、柱状假丝酵母、米曲霉、枯草芽孢杆菌或毕赤酵母菌。

10.一种酶制剂，包含权利要求1～4中任一项所述的修饰型脂肪酶。

11.一种油脂的分解方法，其特征在于，使权利要求1～4中任一项所述的酶或权利要求10所述的酶制剂作用于油脂，进行酶反应。

12.根据权利要求11所述的分解方法，其中，在30℃～70℃下进行酶反应。

13.一种修饰型脂肪酶的制备方法，包括以下的步骤(I)～(III)：

(I)准备编码序列号2～7中任一个氨基酸序列的核酸的步骤；

(II)使上述核酸表达的步骤，以及

(III)回收表达产物的步骤。