[发明专利]基于唾液白介素-1β以及肝细胞生长因子的牙龈炎的诊断

说明书

公开了一种用于评估人类受试者中存在牙龈炎的体外方法。该方法基于对三种生物标志物蛋白质的确定选择的构思。相应的，在受试者的唾液样本中，测量蛋白质肝细胞生长因子(HGF)以及白介素‑1β(IL‑1β)，以及C反应蛋白质(CRP)和血红蛋白质中的至少一者的浓度。基于所测量的浓度，确定反映所述蛋白质的联合浓度的值。将该值与阈值进行比较，该阈值以相同的方式反映与不存在牙龈炎或牙周炎相关联的联合浓度。所述比较允许评估检测值是否指示受试者中存在牙龈炎。从而，典型地，反映联合浓度高于阈值所反映的联合浓度的测试值指示存在牙龈炎。

技术领域

本发明属于口腔护理领域，并且涉及基于唾液的牙周疾病的诊断。特别地，本发明涉及用于确定发生牙龈炎的试剂盒以及方法。

背景技术

牙龈炎症或牙龈炎主要通过牙菌膜或牙菌斑附着在牙齿表面引起，是一种非破坏性的牙周疾病。如果不检测和治疗，可逆性牙龈炎通常会导致牙齿周围组织(即牙周组织)的炎症，这种情况被定义为牙周炎，其不可逆并且导致组织破坏以及牙槽骨脱落(loss)，以及最终导致牙齿脱落。在牙龈疾病的发展过程中，通常会有与其相关联的临床症状以及体征，诸如牙龈肿胀，颜色由粉红色变为深红色，牙龈出血，口臭以及牙龈变得更脆弱(tender)或触痛。

严重的牙周炎症应及时调查，在诸如糖尿病、HIV感染、血小板减少以及白血病的情况下。例如，在糖尿病患者情况下，严重的牙周疾病可能是各种糖尿病并发症的有力预测指标，包括肾病、中风、短暂性脑缺血发作、心绞痛、心肌梗塞和心力衰竭。

因此，早期以及准确诊断牙周疾病，从健康的角度看很重要。为了这个目的，特别是在牙龈炎阶段的诊断是被期待的。

在一般牙科实践中，牙周疾病的诊断仍然较差(Morgan RG(2001)。Brit Dent J191：436-41)，导致相对较低的治疗干预率和大量未经治疗的病例。当前的诊断依赖于牙科专业人员对口腔组织(颜色、肿胀、探查出血程度、探查龈袋深度，以及口腔X射线造成的骨脱落)进行不精确的主观临床检查。这些常规方法耗时，以及所使用的某些技术(龈袋深度、X射线)反映了历史事件，诸如过去的疾病活动，而不是当前的疾病活动或对进一步疾病的敏感性。因此，期望更客观、更快、准确、诊断更易于使用，其优选也可以由非专业人员执行。从而，期待测量现有疾病活动，以及可能的受试者对进一步的牙周疾病的敏感性。

长期以来，唾液或口腔液长期以来被提倡作为口腔和一般疾病的诊断液，以及随着微型生物传感器(也称为“芯片上的实验室”)的出现，用于快速椅旁测试的即时诊断获得了更大的科学和临床兴趣(Lee等人,Salivary diagnostics.Orthod Craniofac Res,12(3)(2009),pp.206–211)。

特别是对于牙周疾病的检测，与组织炎症和分解相关的炎症性生物标志物可能会由于邻近而容易地在唾液中中止，这表明唾液具有用于牙周疾病检测的强大潜力。的确，这个领域因此引起了明显的兴趣以及提出了令人鼓舞的结果，然而还没有确定的测试出现。

先前用于唾液生物标志物即时测试发展的限制包括缺少适用于诊疗助手应用的技术以及无法分析各个样本中的多种生物标志物。同样，在这样的测试中包括哪些多种生物标志物的选择没有在文献中得到充分的解决，也没有在实际测试中实施。这些挑战被讨论在Ji&Choi,Front Cell Infect Microbiol.2015；5:65。

生物标志物代表了支持临床表现的生物学指标，并且因而是诊断牙周疾病临床结果的客观测量。最终，经过验证的生物标志物可以被用于评估未来疾病的风险，在最早阶段识别疾病，识别对初始治疗的反应，以及允许实施预防策略。

当前用于诊断牙龈炎的方法包括估计龈袋深度，探测时的出血水平和牙龈指数。这是劳动密集型过程，牙医不会对每个患者和/或每次就诊都执行，以及消费者无法执行(自我诊断)。