[发明专利]UNYLINKER快速裂解

说明书

本发明涉及使用固体支持物的寡核苷酸合成领域，且特别涉及如下发现，当使用连接至UnyLinker类型的固体支持物的3’氧基‑LNA核苷时，裂解和托保护极快地发生。

发明领域

本发明涉及使用固体支持物的寡核苷酸合成领域，特别涉及当使用连接至UnyLinker型固体支持物的3’氧基-LNA核苷时裂解和脱保护极为快速地发生的发现。

背景

Ravikumar等人，Organic Process Research&Development 2008，12，399-410报道了用于寡核苷酸合成的UnyLinker固体支持物，并且在55℃下8小时内实现了从UnyLinker支持物上的裂解和脱保护(小规模合成)。

Guzaev和Manoharan，J.AM.CHEM.SOC.2003，125，2380-2381公开了寡核苷酸从固体支持物上裂解的动力学比在3′末端带有2′-O-烷基核糖核苷残基的化合物快1-5-2.3倍。

WO2005/049621公开了5，6-二羟基-异吲哚衍生物作为用于寡聚体固相合成的接头。

发明描述

本发明提供了从固体支持物上裂解寡核苷酸的方法，所述方法包含下列步骤：(i)用浓氢氧化铵溶液处理与固体支持物结合的寡核苷酸至少约30分钟且不超过约约6小时，其中与固体支持物连接的寡核苷酸的3′核苷是LNA核苷，其如式I或II在3′位共价连接至固体支持物上，

其中

A′和A″之一为SM或L-SM，

SM是支持媒介物；

L为连接部分，

A′和A″的另一个为H或取代基；

R_u、R_v、R_w、R_X、R_y和R_z各自为H、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基或取代的炔基；

Y₁和Y₂各自彼此独立地为O、S、NR₁CH₂或CR₁R₁：R₁为H、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基或取代的炔基；

G₁为O、S或NR′；其中R′为H或取代基；X为O或S，R^c为H或氰基乙基；其中碱基为核碱基，且R³为寡核苷酸的其余部分。

在一些实施方案中，Y₁和Y₂各自为O。

在一些实施方案中，Y₁和Y₂的至少一个为O。

在一些实施方案中，A″是苯基。

在一些实施方案中，A″为L-SM。

在一些实施方案中，A′为L-SM。

本发明提供了从固体支持物上裂解寡核苷酸的方法，所述方法包括下列步骤：(i)用浓氢氧化铵溶液处理与固体支持物结合的寡核苷酸至少30分钟且不超过约6小时，其中与固体支持物连接的寡核苷酸的3′核苷是LNA核苷，其如式I在3′位共价连接至固体支持物上。

本发明提供了从固体支持物上裂解寡核苷酸的方法，所述方法包括下列步骤：(i)用浓氢氧化铵溶液处理与固体支持物结合的寡核苷酸至少30分钟且不超过约6小时，其中与固体支持物连接的寡核苷酸的3′核苷是LNA核苷，其如式A或C在3′位共价连接至固体支持物上：