[发明专利]UNYLINKER快速裂解在审

专利信息
申请号: 201880019635.2 申请日: 2018-03-22
公开(公告)号: CN110446718A 公开(公告)日: 2019-11-12
发明(设计)人: D·J·汉森;M·梅勒加尔德;M·莫根森 申请(专利权)人: 罗氏创新中心哥本哈根有限公司
主分类号: C07H1/00 分类号: C07H1/00;C07H21/00
代理公司: 北京市中咨律师事务所 11247 代理人: 张建;黄革生
地址: 丹麦霍*** 国省代码: 丹麦;DK
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摘要:
搜索关键词: 固体支持物 寡核苷酸 合成领域 快速裂解 保护极 核苷 裂解 氧基 发现
【权利要求书】:

1.用于从固体支持物上裂解寡核苷酸的方法,所述方法包含下列步骤:(i)用浓氢氧化铵溶液处理与固体支持物结合的寡核苷酸至少约30分钟并且不再超过约6小时,其中与固体支持物连接的寡核苷酸的3′核苷为LNA核苷,其如式I或II在3′位置共价连接至固体支持物上,

其中

A′和A″之一为SM或L-SM,

SM是支持媒介物;

L为连接部分,

A′和A″的另一个为H或取代基;

Ru、Rv、Rw、Rx、Ry和Rz各自为H、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基或取代的炔基;

Y1和Y2各自彼此独立地为O、S、NR1CH2或CR1R1:R1为H、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基或取代的炔基;

G1为O、S或NR′;其中R′为H或取代基,

X为O或S,Rc为H或氰基乙基;其中碱基为核碱基,且R3为寡核苷酸的其余部分。

2.根据权利要求1的方法,其中与固体支持物连接的寡核苷酸的3′核苷是LNA核苷,其如式A或C在3′位共价连接至固体支持物上:

其中黑色圆圈表示固体支持物;X为O或S,Rc为H或氰基乙基;Re为芳基或C1-10烷基,例如苯基、异丙基或甲基;其中碱基为核碱基,R3为寡核苷酸的其余部分。

3.根据权利要求1或2的方法,其中与固体支持物连接的寡核苷酸的3′核苷是LNA核苷,其如式I或式A在3′位置共价连接至固体支持物上。

4.根据权利要求1或2的方法,其中与固体支持物连接的寡核苷酸的3′核苷是LNA核苷,其如式II或式C在3′位置共价连接至固体支持物上。

5.根据权利要求1-4任一项的方法,其中A”或Re为甲基、异丙基或苯基。

6.根据权利要求1-5任一项的方法,其中Rc为氰基乙基。

7.根据权利要求1-6任一项的方法,其中X为O。

8.根据权利要求1-6任一项的方法,其中X为S。

9.根据权利要求1-8任一项的方法,其中用氢氧化铵溶液处理与固体支持物结合的寡核苷酸的步骤在室温至约60℃的温度下进行。

10.根据权利要求1-8任一项的方法,其中用氢氧化铵溶液处理与固体支持物结合的寡核苷酸的步骤在约50℃至约60℃例如在约55℃的温度下进行。

11.根据权利要求1-10任一项的方法,其中用氢氧化铵溶液处理与固体支持物结合的寡核苷酸的步骤进行至少约30分钟且不超过约4小时的时间期限。

12.根据权利要求1-10任一项的方法,其中用氢氧化铵溶液处理结合至固体支持物的寡核苷酸的步骤进行至少约30分钟且不超过约2小时。

13.根据权利要求1-10的方法,其中用氢氧化铵溶液处理结合至固体支持物的寡核苷酸的步骤进行至多约1小时或约1小时。

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