[发明专利]治疗性蛋白质对EV的改善加载

权利要求书

1.一种融合多肽，其包含至少一种目的蛋白(POI)、至少一种外来体分选结构域和至少一种多聚化结构域。

2.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述多聚化结构域是二聚化结构域、三聚化结构域、四聚化结构域或任何更高级的多聚化结构域。

3.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述外来体分选结构域选自CD9、CD53、CD63、CD81、CD54、CD50、FLOT1、FLOT2、CD49d、CD71、CD133、CD138、CD235a、转铁蛋白受体、转铁蛋白受体内体结构域、ALIX、内居蛋白-1(内居蛋白)、内居蛋白-2、Lamp2b、及其任何区域、结构域、衍生物和/或组合。

4.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述多聚化结构域选自包括以下的组：亮氨酸拉链、fold-on结构域、片段X、胶原结构域、2G12 IgG同源二聚体、线粒体抗病毒信号转导蛋白CARD长丝、心脏受磷蛋白跨膜五聚体、甲状旁腺激素二聚化结构域、血型糖蛋白A跨膜、HIV Gp41三聚化结构域、HPV45癌蛋白E7 C-末端二聚体结构域及其任何组合。

5.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述多聚化结构域是同源多聚化结构域。

6.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述POI选自以下组中的至少一种：

i.gp130、TNFR、IL17R、IL23R、IL1βR、IL6R、CD55、IL12R、CCR6，与IL1α、IL1β、IL6、IL6-ILR复合物、IL12、IL17、IL23、TNFα、MCP-1、CCL20、补体蛋白、激活素或肌肉生长抑制素中的任一种结合的任何其他诱饵受体或诱饵结合物；

ii.靶向肽或蛋白质，例如RVG肽，VSV肽，p-选择结合肽，e-选择结合肽和/或任何其他靶向肽或蛋白质；

iii.用于治疗溶酶体贮积症的蛋白质。

7.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述POI选自SEQ ID NOs 47-67和SEQ ID NO 87-88。

8.一种多核苷酸构建体，其编码权利要求1-7中任一项所述的融合多肽。

9.一种细胞外囊泡(EV)，其包含权利要求1-7中任一项所述的融合多肽和/或权利要求8所述的多核苷酸。

10.根据权利要求9所述的EV，其中所述EV包含多个根据权利要求1-7中任一项所述的融合多肽。

11.一种细胞，其包含权利要求1-7中任一项所述的融合多肽、权利要求8所述的多核苷酸构建体和/或权利要求9-10中任一项所述的EV。

12.一种组合物，其包含多个根据权利要求9-10中任一项所述的EV和/或根据权利要求1-7中任一项所述的融合多肽和/或根据权利要求8所述的多核苷酸构建体。

13.药物组合物，其包含多个根据权利要求9-10中任一项所述的EV和/或根据权利要求1-7中任一项所述的融合多肽和/或根据权利要求8所述的多核苷酸构建体和药学上可接受的赋形剂或稀释剂。

14.一种将目的蛋白(POI)加载到EV中的方法，包括以下步骤：

i.提供编码至少一种多聚化结构域、至少一种外来体分选蛋白和所述POI的融合多核苷酸构建体；和，

ii.在EV产生细胞中表达所述融合构建体。