[发明专利]一种磷酸化改性的鳕鱼胶原蛋白肽的制备方法

说明书

本发明公开了一种磷酸化改性的鳕鱼胶原蛋白肽的制备方法，其包括以下步骤：（1）将鳕鱼鳞片依次在清水、碳酸氢钠溶液、柠檬酸溶液、EDTA溶液中清洗；（2）将步骤1中得到清洗后的鳕鱼鳞片中加入蛋白酶，水解随后灭活，离心，取得上清液；（3）将步骤2得到的上清液脱盐，分离弃去1000Da以下的组分，冻干，得到鳕鱼胶原蛋白肽干粉，并溶解到水中；（4）将步骤3的溶液加热，调节pH，随后加入三聚磷酸钠，搅拌反应；（5）收集步骤4的反应液，脱盐，冻干得到磷酸化改性的鳕鱼胶原蛋白肽。本发明的方法通过对胶原蛋白进行预处理，实现了磷酸化加工的更高效进行，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及肽的制备，尤其是一种磷酸化改性的鳕鱼胶原蛋白肽的制备方法。

背景技术

鳕鱼，是鳕科（Gadidae）鱼类及鳕形目（Gadiformes）其他科部分鱼类的统称，有50多种，是主要食用鱼类之一。鳕鱼原产于从北欧至加拿大及美国东部的北大西洋寒冷水域。21世纪初，鳕鱼主要出产国是加拿大、冰岛、挪威及俄罗斯，日本产地主要在北海道。鳕鱼是经济价值较高的高档鱼类，常将其鱼肉用于煎制等用途。然而其鱼鳞和鱼皮往往得不到良好的利用，往往只能作为下脚料加工成肥料或者饲料，其经济附加值较低。目前，可以将其鱼鳞和鱼皮制备成胶原蛋白肽，然而该胶原蛋白肽在水中的分散性较差，难以作为高档的口服液等用途来进行使用。

发明内容

为了克服现有鳕鱼胶原蛋白肽在水中的分散性差的不足，本发明的目的在于提供了一种磷酸化改性的鳕鱼胶原蛋白肽的制备方法。

在本发明的一个方面，提供了一种磷酸化改性的鳕鱼胶原蛋白肽的制备方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：

（1）将鳕鱼鳞片依次在清水、1-5%的碳酸氢钠溶液、1-3%的柠檬酸溶液、1-5%的EDTA溶液中清洗；

（2）将步骤1中得到的清洗后的鳕鱼鳞片中加入蛋白酶，并且在40-50摄氏度下，pH为6-8下水解3-5小时并且随后灭活，离心并且取得上清液；

（3）将步骤2得到的上清液脱盐，分离弃去1000Da以下的组分，冻干并且得到鳕鱼胶原蛋白肽干粉，取用100重量份，并且溶解到10000-20000重量份的水中；

（4）将步骤3的溶液加热到30-40摄氏度，pH调节到7.5-8.5，随后加入三聚磷酸钠1-5重量份，并且搅拌反应2-5小时；

（5）收集步骤4的反应液，脱盐并且冻干得到磷酸化改性的鳕鱼胶原蛋白肽。

在本发明优选的方面，在步骤1中，将鳕鱼鳞片依次在清水、2%的碳酸氢钠溶液、2%的柠檬酸溶液、3%的EDTA溶液中清洗，每次清洗15分钟。

在本发明优选的方面，在步骤2中，在42摄氏度下，pH为7.2下水解4.5小时并且随后灭活，离心并且取得上清液。

在本发明优选的方面，在步骤2中，所述的蛋白酶是中性蛋白酶和碱性蛋白酶按照1:1-3重量比配置成的。

在本发明优选的方面，在步骤2中，所述的蛋白酶是中性蛋白酶或者碱性蛋白酶。

在本发明优选的方面，在步骤3中，所述的分离采取凝胶排阻色谱或者透析方法来进行。

在本发明优选的方面，将步骤3的溶液加热到35摄氏度，pH调节到8.0，加入三聚磷酸钠3.5重量份，并且搅拌反应4小时。

本发明的方法通过对胶原蛋白进行预处理，实现了磷酸化加工的更高效进行，具有广阔的应用前景。

具体实施方式

除非另外地说明，本发明所使用的鳕鱼鳞片采购自本地水产加工厂的下脚料区域，其始终在0-4摄氏度下保存并且保持新鲜。

实施例1