[发明专利]一种肉类食品中N-二甲基亚硝胺的检测方法

说明书

本法发明公开了一种肉类食品中N‑二甲基亚硝胺的检测方法，包括如下步骤：S1.取待测样品，加入正己烷‑乙腈‑水，振荡、离心，弃去正己烷层；S2.向S1的溶液中加入二氯甲烷、无水硫酸钠，振荡、离心，取有机层于浓缩瓶，接收瓶中加入冰水，350～360 mbar、34～36℃条件下旋蒸除去二氯甲烷，若剩余溶液大于1mL，加入二氯甲烷继续旋蒸至剩余溶液约0.5～1mL；S3.将S2残余物移出，依次以少量乙腈、乙腈饱和的正己烷和的正己烷清洗S2浓缩瓶，洗涤液与S2残余物混匀，离心，弃去正己烷层，将乙腈层定容即得待测样液，上GC‑MS测定。本发明所使用的前处理方法易于操作，可有效除去待测样品中的高油脂，同时通过改进浓缩条件，NDMA的回收率得到显著改善。

技术领域

本发明属于食品检测技术领域，更具体地，涉及一种肉类食品中N-二甲基亚硝胺的检测方法。

背景技术

亚硝胺类几乎可以引发人体所有脏器肿瘤，其中以消化道癌最为常见。主要来自化肥的应用，亚硝胺类化合物普遍存在于谷物、牛奶、干酪、烟酒、熏肉、烤肉、海鱼、罐装食品以及饮水中。国内外对亚硝胺的检测研究比较也比较多。对于腌制水产品、儿童乳胶质谱、饮用水、香肠、水果、香烟、啤酒、化妆品等类型的样品中的亚硝胺均有研究。测定亚硝胺的检测器包括质谱检测器、三重四级杆、热能分析仪、氮磷检测器等。样品的提取方式有水蒸气蒸馏法、乙腈提取、二氯甲烷提取、固相萃取等常见的提取方式。对于亚硝胺的净化主要是使用层析柱、固相萃取柱和液液萃取进行净化。

在多数文献里，亚硝胺类化合物测定的前处理多是采用液液萃取、浓缩检测，由于N-二甲基亚硝胺(NDMA)有一定的水溶性而且挥发性比较高，加标回收率多在40％～90％之间，近年来也有固相微萃取、液液微萃取等提取浓缩手段应用于亚硝胺的提取浓缩，但目前净化方法应用最广泛的是固相萃取法。对亚硝胺的衍生化再检测也有过研究，但步骤较为繁琐。多数亚硝胺检测的提取净化方法过于复杂。CN201310349755.8公开了一种利用超声提取快速测定肉制品中二甲基亚硝胺的方法，该方法简单，耗时短，但是却缺少足够的净化手段，在遇到高脂的肉类样品时使浓缩步骤难以进行。另外由于NDMA在实验过程中的主要损失步骤是浓缩步骤，现有技术采用的浓缩手段容易导致NDMA损失大、准确度下降等问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有中缺少足够的净化手段，在遇到高脂样品时在浓缩步骤难以进行及现有技术采用的浓缩手段容易导致NDMA损失大、准确度下降等问题，提供一种用于肉类食品中N-二甲基亚硝胺检测的样品前处理方法。

本发明的第二个目的是提供一种肉类食品中N-二甲基亚硝胺的检测方法本发明的上述目的是通过以下技术方案给予实现的：

一种用于肉类食品中N-二甲基亚硝胺检测的样品前处理方法，包括如下步骤：

S1.取待测样品，加入正己烷、乙腈、水，振荡、离心，弃去正己烷层；

S2.向S1的溶液中加入二氯甲烷、无水硫酸钠，振荡、离心，取有机层于浓缩瓶，接收瓶中加入冰水，350～360mbar、34～36℃条件下旋蒸除去二氯甲烷，若剩余溶液大于1mL，加入二氯甲烷继续旋蒸至剩余溶液约0.5～1mL；所述有机层的体积为乙腈和二氯甲烷总体积的一半；

S3.将S2残余物移出，依次以少量乙腈、乙腈饱和的正己烷清洗S2浓缩瓶，洗涤液与S2残余物混匀，离心，弃去正己烷层，将乙腈层定容即得待测样液。

本发明通过以正己烷-乙腈-水进行除脂，除去大部分非极性杂质；其中，乙腈和后续的二氯甲烷主要对肉类食品中N-二甲基亚硝胺进行提取，正己烷主要用于除去肉类食品中的油脂，通过加入一定的水，来替代部分乙腈，可以更好的实现分层效果，使得含有油脂的正己烷层被更好的去除，然后再利用无水硫酸钠来除水；另外，为解决NDMA在浓缩过程中损失过多的缺陷，利用压力控制与混合溶剂旋蒸来降低NDMA在浓缩过程中的损失；最后再通过S3的净化步骤，使乙腈易于定容。