[发明专利]一种卵子冲洗液及其制备方法

说明书

本发明公开了一种卵子冲洗液，其配方包括肝素钠1.5～3.5IU/mL，碳酸氢钠1～6mM/L、HEPES 10～26.5mM/L，无机盐氯化钠92.5～101.5mM/L、氯化钾4.45～4.95mM/L、二水氯化钙1.90～2.20mM/L、磷酸二氢钾0.30～0.44mM/L和七水硫酸镁0.15～0.20mM/L，硫酸庆大霉素0.01～0.05g/L，葡萄糖2.60～2.88mM/L，丙酮酸钠0.31～0.35mM/L，L‑乳酸钠10.5～10.9mM/L，人血清白蛋白5～10g/L。

技术领域

本发明属于人类辅助生殖领域，具体涉及一种卵子冲洗液以及制备所述卵子冲洗液的方法。

背景技术

人类辅助生殖领域中，卵子冲洗液作为一种体外缓冲液，用于从人卵泡中吸取卵子，冲洗和处理卵子等，以保持卵子在体外或培养箱外的活性。在临床中，无论是第一代技术试管婴儿(IVF-ET)还是第二代技术单精子胞浆注射(ICSI)，卵子冲洗液都是不可或缺的试剂。高效稳定的卵子冲洗液对获得足够数量可用卵子，保证试管婴儿周期顺利进行具有重要意义。

HEPES是一种两性离子缓冲剂，是目前为止在临床和生物学研究中可用的最佳通用缓冲器之一。其缓冲能力在pH 6.8到8.2之间有效。HEPES在pH缓冲及细胞培养领域中已经被广泛应用，包括组织培养。碳酸氢钠水溶液因水解而呈微碱性，在培养液中形成碳酸盐/碳酸氢盐缓冲体系。

肝素是由两种多糖交替连接而成的多聚体，在体内外都有抗凝血作用，临床上主要用于抗凝血、血栓性疾病、心血管手术、体外循环、血液透析等。在卵子收集过程中，取卵针刺破卵泡可能造成出血而产生血凝块。在卵子冲洗液中加入适量肝素可有效避免血凝块产生，以防止取卵针堵塞或给卵子拾取造成影响。

在卵子冲洗液中通过优化碳酸氢钠及HEPES的配比，能有效维持pH值，以保证卵子在体外或在培养箱外短暂操作时的环境稳定。同时，添加肝素钠能有效防止取卵时血凝块的产生，避免了取卵针的堵塞或拾取卵子时血凝块的干扰，使取卵过程更高效快捷，进而降低对卵子的损伤。

发明内容

本发明的目的是提供一种保持卵子在体外活性的卵子冲洗液，不仅能在培养箱外有效地维持pH值，也能减少取卵过程中血凝块的产生，为高效地取卵提供便利，从而尽可能地降低对卵子的损伤。

为实现上述目的，本发明的提供技术方案为：

一种卵子冲洗液，其以肝素钠为抗凝成分、以碳酸氢钠和HEPES为pH缓冲体系添加到含抗菌剂和酸碱指示剂及蛋白的基础盐溶液。

进一步地，所述的抗凝成分肝素钠含量为1.5～3.5IU/mL，pH缓冲体系中碳酸氢钠含量为1～6mM/L，HEPES含量为10～26.5mM/L。

更进一步地，所述基础盐溶液配方为无机盐氯化钠92.5～101.5mM/L、氯化钾4.45～4.95mM/L、二水氯化钙1.90～2.20mM/L、磷酸二氢钾0.30～0.44mM/L和七水硫酸镁0.15～0.20mM/L，硫酸庆大霉素0.01～0.05g/L，葡萄糖2.60～2.88mM/L，丙酮酸钠0.31～0.35mM/L，L-乳酸钠10.5～10.9mM/L，人血清白蛋白5～10g/L。

再进一步地，所述配方还包括pH指示剂酚红0.005～0.01g/L。

本发明的另一个目的是提供所述的卵子冲洗液在人类辅助生殖过程中卵子冲取中的应用。

本发明的再一个目的是提供一种制备卵子冲洗液的方法，将抗凝成分肝素钠和pH缓冲剂HEPES溶解于含抗菌剂和酸碱指示剂的基础盐溶液中配制而成。

进一步地，所述方法包括以下步骤：

a、按本发明所述配方称量所有固体成分并分开放置；