[发明专利]N6衍生肽的应用

说明书

本发明公开了N6衍生肽的应用，所述N6衍生肽是由序列如SEQ ID NO:1所示的抗菌肽N6的羧基末端经酰胺化得到的。本发明通过对抗菌肽N6分子结构进行优化设计，得到衍生肽。实验证明衍生肽对革兰氏阴性菌具有很好的杀菌效果。羧基末端的酰胺化衍生肽具有更好的耐酸性、更低的溶血性和细胞毒性，使得衍生肽具有比N6更好的体内治疗小鼠毒血症效果；衍生肽分子量小，人工合成方便，是极具应用价值的小分子多肽，可用于制备新型抗菌抗感染药物，具有良好的应用前景。此外，本发明为新型抗菌药物的创制提供理论参考依据。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体地说，涉及一种N6衍生肽(N6NH₂)的应用。

背景技术

抗菌肽是由生物有机体产生的前体经蛋白酶降解生成的具有生物学活性的小分子多肽，主要构成了机体防御的第一道防线。专抗革兰氏阴性菌的抗菌肽对细菌的作用机制主要是以膜作为靶点，通过静电力和受体介导的细胞膜作用力，引起膜通透性改变，降低细胞膜稳定性，或插入细胞膜中形成跨膜孔洞，最终导致细菌内容物外泄而死亡。由于抗菌肽特殊的作用机制，使其不易产生耐药性，并且对许多临床耐药菌同样具有杀菌作用。因此，抗菌肽被认为可以替代传统抗生素，应用于饲料添加剂、医药卫生和食品防腐等领域。

抗菌肽N6是海蚯蚓肽NZ17074的衍生物，在体外具有较强的杀灭革兰阴性菌活性，其抗菌活性、细胞毒性有待进一步改善。

发明内容

本发明的目的是提供一种结构稳定性基本不变的情况下体内抗菌效果得以显著提升的N6衍生肽的应用。

为了实现本发明目的，第一方面，本发明提供一种N6衍生肽(N6NH₂)，由序列如SEQID NO:1所示的抗菌肽N6的羧基末端(C端)经酰胺化得到的，其结构如下：GFAWNVCVYRNGVRVCHRRAN-NH₂。所述N6衍生肽带5个正电荷，1对二硫键(Cys7-Cys16)，分子量为2476.8Da，等电点为11.64。

第二方面，本发明提供所述N6衍生肽在制备治疗细菌感染的抗菌药物或组合物中的应用。

本发明所述细菌包括革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌。所述革兰氏阴性菌包括但不限于埃希氏菌属(Escherichia)细菌、沙门氏菌属(Salmonella)细菌。

进一步地，所述革兰氏阴性菌包括但不限于大肠杆菌(E.coli)、铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)、肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)、鼠伤寒沙门氏菌(S.Typhimurium)。例如，E.coli CVCC195。

所述革兰氏阳性菌包括但不限于葡萄球菌属(Staphylococcus)细菌。优选金黄色葡萄球菌(S.aureus)、猪葡萄球菌(S.hyicus)。

第三方面，本发明提供所述N6衍生肽在制备抗毒血症药物或组合物中的应用。

第四方面，本发明提供由所述N6衍生肽制备的治疗细菌(特别是革兰氏阴性菌)感染的抗菌药物或组合物。

第五方面，本发明提供由所述N6衍生肽制备的抗毒血症(特别是由革兰氏阴性菌所致毒血症)药物或组合物。

本发明对N6NH₂的抗菌活性、血清稳定性、pH稳定性、溶血性、细胞毒性和体内外药效进行了评价，结果表明N6NH₂与母体肽N6的MIC值相同，其血清稳定性与N6相当；N6NH₂比N6具有更强的耐酸性、更低的溶血性和细胞毒性；在小鼠毒血症模型的试验中能够显著提高小鼠的存活率，4μmol/kg N6NH₂对致死剂量大肠杆菌攻毒小鼠的存活率为100％，明显高于等当量的N6(80％)。

借由上述技术方案，本发明至少具有下列优点及有益效果：