[发明专利]一种利用高速逆流色谱技术制备具有抗肿瘤作用的中药提取物的方法

说明书

本发明涉及中药技术领域，具体公开了一种利用高速逆流色谱技术制备具有抗肿瘤作用的中药提取物的方法。包含如下步骤：(1)取中药材丁癸草，用醇提取，浓缩提取液去除溶剂得丁癸草醇提取物；(2)将丁癸草醇提取物加水混悬，然后依次用氯仿、乙酸乙酯分别萃取1～3次，取乙酸乙酯萃取部位，浓缩去除乙酸乙酯溶剂，得乙酸乙酯萃取物；(3)将乙酸乙酯萃取物采用高速逆流色谱法进行分离，得所述的中药提取物。由该方法制备得到的中药提取物具有抗肺癌以及鼻咽癌的作用；尤其是对鼻咽癌效果更显著。

技术领域

本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种利用高速逆流色谱技术制备具有抗肿瘤作用的中药提取物的方法。

背景技术

丁癸草，中药材名，为豆科植物丁癸草的全草。夏季采收，功能主治为：清热，解毒，去瘀，治感冒，高热抽搐，腹泻，黄疸，痢疾，小儿疳积，喉痛，目赤，疔疮肿毒，乳腺炎。

目前，现有文献对丁癸草中具有抗肿瘤作用的有效成分的研究报道并不多。而丁癸草中含有的化学成分众多，哪些有效部位具有抗肿瘤作用需要研发人员进一步研究开发；此外，由于肿瘤的种类也是十分众多的，丁癸草中的有效部位是否对所有肿瘤都有效，还是对部分肿瘤有效，这仍需研发人员通过大量的实验进行研究攻关。因此，以我国传统的中药材丁癸草为原料，开发出抗肿瘤药物对于肿瘤的治疗具有重要的意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，为了克服现有技术对丁癸草中抗肿瘤有效部位的开发不足，提供一种利用高速逆流色谱技术制备具有抗肿瘤作用的中药提取物的方法。由该方法制备得到的癸草有效部位具有抗肺癌以及鼻咽癌的作用。

本发明所要解决的上述技术问题，通过以下技术方案予以实现：

一种利用高速逆流色谱技术制备具有抗肿瘤作用的中药提取物的方法，包含如下步骤：

(1)取中药材丁癸草，用醇提取，浓缩提取液去除溶剂得丁癸草醇提取物；

(2)将丁癸草醇提取物加水混悬，然后依次用氯仿、乙酸乙酯分别萃取1～3次，取乙酸乙酯萃取部位，浓缩去除乙酸乙酯溶剂，得乙酸乙酯萃取物；

(3)将乙酸乙酯萃取物采用高速逆流色谱法进行分离，得所述的中药提取物；

其中，步骤(3)中高速逆流色谱法的具体方法为：采用的溶剂为由正己烷、乙酸乙酯、甲醇以及水组成；其中正己烷、乙酸乙酯、甲醇以及水的体积比为1～3:3～4:2～3:1～2；高速逆流色谱主机顺时针转动，转速为700～1000rpm；固定相保留值为：60％～80％，流动相的流速为1～2ml/min；分离温度为15～30℃；紫外检测波长为220～254nm；进样后收集25～33min的洗脱部位，即得所述的中药提取物。

最优选地，所述的正己烷、乙酸乙酯、甲醇以及水的体积比为2:3.5:2.5:1.5。

最优选地，高速逆流色谱主机顺时针转动，转速为855rpm；固定相保留值为：76％，流动相的流速为1.5ml/min；分离温度为25℃；紫外检测波长为235nm。

优选地，步骤(1)中所述的提取为加热回流提取。

最优选地，步骤(1)中所述的用醇提取是指用体积分数为90～100％的乙醇水溶液。

最优选地，步骤(1)中所述的用醇提取是指用体积分数为95％的乙醇水溶液。

优选地，所述的加热回流提取次数为1～3次，每次的提取时间为0.5～1.5h；其中中药材丁癸草与乙醇水溶液的用量比为1g：12～18mL。

最优选地，所述的加热回流提取次数为1次，每次的提取时间为1h；其中中药材丁癸草与乙醇水溶液的用量比为1g：15mL。