[发明专利]一种利用高速逆流色谱技术制备具有抗肿瘤作用的中药提取物的方法

权利要求书

1.一种利用高速逆流色谱技术制备具有抗肿瘤作用的中药提取物的方法，其特征在于，包含如下步骤：

（1）取中药材丁癸草，用醇提取，浓缩提取液去除溶剂得丁癸草醇提取物；

（2）将丁癸草醇提取物加水混悬，然后依次用氯仿、乙酸乙酯分别萃取

1~3次，取乙酸乙酯萃取部位，浓缩去除乙酸乙酯溶剂，得乙酸乙酯萃取物；

（3）将乙酸乙酯萃取物采用高速逆流色谱法进行分离，得所述的中药提取物；

其中，步骤（1）中所述的提取为加热回流提取；步骤（1）中所述的用醇提取是指用体积分数为90~100%的乙醇水溶液；所述的加热回流提取次数为1~3次，每次的提取时间为0.5~1.5h；其中中药材丁癸草与乙醇水溶液的用量比为1g：12~18mL；

步骤（2）中丁癸草醇提取物与水的用量比为1g：15~30mL；每次萃取过程中氯仿和乙酸乙酯的体积用量与水的体积用量比为1:0.5~1.5；

步骤（3）中高速逆流色谱法的具体方法为：采用的溶剂为由正己烷、乙酸乙酯、甲醇以及水组成；其中正己烷、乙酸乙酯、甲醇以及水的体积比为2:3.5:2.5:1.5；高速逆流色谱主机顺时针转动，转速为700~1000rpm；固定相保留值为：60％~80％，流动相的流速为1~2ml/min；分离温度为15~30℃；紫外检测波长为220~254nm；进样后收集25~33min的洗脱部位，即得所述的中药提取物。

2.根据权利要求1所述的利用高速逆流色谱技术制备具有抗肿瘤作用的中药提取物的方法，其特征在于，高速逆流色谱主机顺时针转动，转速为855rpm；固定相保留值为：76％，流动相的流速为1.5ml/min；分离温度为25℃；紫外检测波长为235nm。

3.根据权利要求1所述的利用高速逆流色谱技术制备具有抗肿瘤作用的中药提取物的方法，其特征在于，步骤（1）中所述的用醇提取是指用体积分数为95%的乙醇水溶液。

4.根据权利要求1所述的利用高速逆流色谱技术制备具有抗肿瘤作用的中药提取物的方法，其特征在于，所述的加热回流提取次数为1次，每次的提取时间为1h；其中中药材丁癸草与乙醇水溶液的用量比为1g：15mL。

5.根据权利要求1所述的利用高速逆流色谱技术制备具有抗肿瘤作用的中药提取物的方法，其特征在于，步骤（2）中丁癸草醇提取物与水的用量比为1g：20mL；每次萃取过程中氯仿和乙酸乙酯的体积用量与水的体积用量比为1:1。

6.根据权利要求1所述的利用高速逆流色谱技术制备具有抗肿瘤作用的中药提取物的方法，其特征在于，所述的肿瘤为肺癌或鼻咽癌。

7.权利要求1~6任一项所述的方法制备得到的中药提取物。

8.权利要求7所述的中药提取物在制备抗癌药物中的应用。