[发明专利]一种食品添加剂的制备方法和应用

权利要求书

1.一种双酶法制备葡萄糖基甜菊糖苷的方法，其特征在于，以甜叶菊提取物与麦芽糊精的混合物为底物，底物浓度为20％-55％，加入环糊精糖基转移酶和β-淀粉酶进行双酶催化后，获得葡萄糖基甜菊糖苷粗产品；

其中，

所述甜叶菊提取物中总苷含量不小于50％；

所述底物中甜叶菊提取物和麦芽糊精的添加质量比为1：(1-5)；

所述环糊精糖基转移酶和β-淀粉酶的质量比为(1.1-1.3)：1。

2.一种如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法制备获得的葡萄糖基甜菊糖苷粗产品中在C13或C19位上通过a-1,4键连接有1个、2个或3个葡萄糖基的甜菊糖苷，也称为甜菊糖苷G1-G3，占葡萄糖基甜菊糖苷粗产品总苷含量的70％以上。

3.一种如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述甜叶菊提取物中的总苷由甜菊糖、莱鲍迪苷A(RA)、莱鲍迪苷D(RD)、莱鲍迪苷M(RM)、莱鲍迪苷C(RC)、莱鲍迪苷B(RB),莱鲍迪苷E(RE)，甜茶苷，悬钩子苷、杜克苷A、杜克苷B、甜菊醇、异甜菊醇、甜菊单糖苷，甜菊双糖苷、甜菊三糖苷(STv)中的一种或多种组成。

4.如权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，其中：以甜叶菊提取物与麦芽糊精的混合物为底物，将所述甜叶菊提取物与麦芽糊精混合物溶于水；

优选的，底物浓度为25％-45％；

更优选的，所述底物中甜叶菊提取物和麦芽糊精的添加质量比为1：3；

进一步优选的，所述环糊精糖基转移酶和β-淀粉酶的质量比为1.25：1。

5.如权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一：在酶催化反应罐中以底物浓度为25％-45％将麦芽糊精和甜叶菊提取物溶解在60℃-70℃的水中，以150rpm进行搅拌助溶，其中麦芽糊精和甜叶菊提取物的投放质量比为1.5:1-4:1；

步骤二：加入终浓度为0.5-1.0mg/mL的环糊精糖基转移酶，于60℃-70℃、50-100rpm的条件下反应15-25小时，随后加入终浓度为0.4-0.85mg/mL的β-淀粉酶，于60℃-70℃、50-100rpm的条件下反应1小时；

步骤三：酶催化反应后，调节酶催化反应罐升温至90℃，保持30分钟，随后降温至室温，获得酶催化的葡萄糖基甜菊糖苷粗产品。

6.一种获得精制葡萄糖基甜菊糖苷的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一：使用权利要求1-5任一项所述方法获得葡萄糖基甜菊糖苷粗产品；

步骤二：使用一步树脂法，对葡萄糖基甜菊糖苷粗产品进行分离精制；

第三步：回收获得葡萄糖基甜菊糖苷精制产品。

7.一种如权利要求6所述的获得精制葡萄糖基甜菊糖苷的方法，其特征在于，

步骤一：使用权利要求1-5任一项所述方法获得葡萄糖基甜菊糖苷粗产品；

步骤二：将步骤一获得的葡萄糖基甜菊糖苷粗产品中加入活性炭进行脱色，然后通过板框过滤，去除活性炭；取过滤液过大孔吸附树脂，树脂饱和后进行水洗，水洗用量约为柱内树脂装填体积的5-8倍，冲洗至无甜味；之后用60％乙醇洗脱，乙醇用量约为柱内树脂装填体积的1-1.5倍，冲洗至无甜味，收集洗脱的糖液；将洗脱后的糖液转入单效蒸发器脱醇，浓缩条件为：料液温度为75℃-90℃、负压0.04-0.06MPa、设备夹层压力为0.2MPa-0.3MPa，待料液脱醇完全后停止设备，开启排空阀至常压后获得浓缩液，加水稀释至固含量20％以下；

步骤三：将步骤二获得的料液进行喷雾干燥，并回收，最终获得葡萄糖基甜菊糖苷精制产品。

8.一种使用权利要求1-5任一项所述方法制备获得的葡萄糖基甜菊糖苷粗产品，其特征在于，所述葡萄糖基甜菊糖苷粗产品中在C13或C19位上通过a-1,4键连接有1个、2个或3个葡萄糖基的甜菊糖苷，也称为甜菊糖苷G1-G3，占葡萄糖基甜菊糖苷粗产品总苷含量的70％以上，且整体催化体系葡萄糖基甜菊糖苷转化率可达到90％。